。ㄒ)管理制度
1.引種來源清楚,應(yīng)帶有譜系及特性資料(如近交代數(shù)、交配方式、遺傳組成、生物學(xué)特性),并應(yīng)符合國際公認(rèn)的遺傳概貌標(biāo)準(zhǔn)。
2.按國際規(guī)定的近交系動物的繁殖系統(tǒng),進行種群維持和生產(chǎn)。
。1)基礎(chǔ)群和血緣擴大群:
應(yīng)以同胞兄妹交配方法進行;A(chǔ)群的維持一定按著近交系的保種方法進行,并應(yīng)具有譜系及個體卡片記錄。
。2)生產(chǎn)群:
以隨機交配方法(或紅綠燈方法)進行生產(chǎn)?蛇B續(xù)繁殖3-5代,其生產(chǎn)群種鼠應(yīng)與基礎(chǔ)群血緣關(guān)系保持相對平行。
。ǘ)遺傳質(zhì)量檢查
1.方法的選擇:
。1)異體皮膚移殖法:無論是大鼠,還是小鼠異體皮膚移植的方法,一直是鑒定近交品系的經(jīng)典方法,由于該方法既經(jīng)濟,又權(quán)威,為首選方法。
(2)生化電泳方法:是近些年來利用同功酶和蛋白質(zhì)的多態(tài)性對近交系動物進行遺傳監(jiān)測的一種常規(guī)方法。由于其快速、準(zhǔn)確、靈敏,在檢出亞系動物時,比起皮膚移殖法,有其獨特之處,可作為近交系小鼠遺傳質(zhì)量檢查的又一重要方法。
2.位點的選擇:
近交系動物遺傳品質(zhì)的變異,主要有三方面的因素:
。1)遺傳污染;
(2)遺傳漂變;
(3)遺傳突變。
在這三方面中遺傳污染危害最大,而另兩方面,在一定時間內(nèi)發(fā)生改變的頻率很低。因此,在位點選擇上,根據(jù)北京市現(xiàn)在常用的10種近交系小鼠,選擇了位于7個染色體上八個差異性位點,作為檢查的第一線位點。如果任何一種品系發(fā)生過遺傳污染,這八個位點中某些位點將會出現(xiàn)雜合或者變異?紤]到位點的選擇盡量分布在多個染色體上,我們又選擇了位于5個染色體上的五個比較容易操作,耗資較少的位點作為第二線位點的檢查。原則上,第一線位點的檢查如果發(fā)現(xiàn)了問題,將不再進行第二線位點的檢查。
第一線位點:
Hbb,Car-2,Gpd,ES-1,ES-3,Trf,Gp1,ldh-1。
第二線位點:
Mup,Pgm-1,ES-10,Sep-1,Ce-2。
3.動物的選擇:
近交系大、小鼠每個品系至少進行四只動物的異體皮膚移植。近交系小鼠皮膚移植成功者還需從核心群中選送四只動物(2♀,2♂年齡不限)進行生化位點的檢查。皮膚移植失敗者,則不考慮進行生化位點的檢查。
4.結(jié)果的判斷:
將檢測報告匯總,由專家小組作出結(jié)論。
見附表五:差異性位點的選擇和10種近交系小鼠的遺傳概貌。
表五
Chromosome Locus/Strain | 7 | 3 | 4 | 8 | 11 | 9 | 7 | 1 |
Hbb | Car-2 | Gpd | ES-1 | ES-3 | Trf | Gpi | Ldh-1 | |
615 | S | a | b | b | O | b | a | a |
TA1 | S | b | b | a | a | b | a | |
Ta2 | d | a | b | b | c | b | b | a |
T739 | S | b | b | b | O | b | a | a |
BALA/C | d | b | b | b | a | b | a | a |
C57BL/O | S | a | a | a | a | b | b | a |
CBA/N | d | a | b | b | c | a | b | b |
C3H/He | d | b | b | b | c | b | b | a |
DBA/2 | d | b | b | b | c | b | a | b |
KK | S | a | a | b | c | b | b | a |