實(shí)驗(yàn)十一 霍亂弧菌
霍亂弧菌(V.cholerae)可分為古典生物型和ElTor生物型；根據(jù)菌體抗原(O抗原)又可分為155個(gè)血清群，其中O1血清群和O139血清群是霍亂的病原菌，能引起霍亂的發(fā)病和流行。
形態(tài)與培養(yǎng)特性
m.zxtf.net.cn/wsj/【材料與方法】
1．霍亂弧菌革蘭染色片。
2．霍亂弧菌(水弧菌代)堿性蛋白胨水培養(yǎng)物。
3．霍亂弧菌于TCBS培養(yǎng)基上的分離培養(yǎng)物。
【結(jié)果】
1．霍亂弧菌為革蘭陰性菌，菌體彎曲呈弧形或逗點(diǎn)狀，平行排列似魚群狀。
2．以懸滴法觀察動(dòng)力，細(xì)菌運(yùn)動(dòng)活潑，呈穿梭樣或流星狀。
3．霍亂弧菌在TCBS培養(yǎng)基上可形成較大、黃色的菌落。
附錄：
（一)熒光菌球試驗(yàn)
【原理】
熒光菌球試驗(yàn)是一種新型的免疫熒光快速診斷技術(shù)。其原理是在細(xì)菌培養(yǎng)液中加一定量熒光抗體，然后接種標(biāo)本，若糞便中有相應(yīng)的病原菌時(shí)，抗體即與之結(jié)合發(fā)生凝集，凝集后細(xì)菌并不死亡，在適宜溫度下仍能繼續(xù)繁殖而集合成團(tuán)，在熒光顯微鏡下呈現(xiàn)一團(tuán)絨球樣熒光，故稱熒光菌球。
【材料與方法】
1．將霍亂弧菌接種于含有一定量熒光抗體的堿性蛋白胨水中，37℃增菌6～8h。
2．挑取1環(huán)上述培養(yǎng)物于清潔玻片上，放上蓋玻片，在熒光顯微鏡下觀察。
【結(jié)果】
熒光球大而發(fā)亮呈圓球狀，結(jié)構(gòu)較疏松，周圍近似卷m.zxtf.net.cn/pharm/發(fā)狀。隨孵育時(shí)間增長，菌球結(jié)構(gòu)致密，周圍較圓，整齊，菌球周圍有刺毛，有的如銀絲般纏繞。孵育時(shí)間短時(shí)，菌球往往呈多形性。
（二)制動(dòng)試驗(yàn)
【原理】
霍亂弧菌在液體培養(yǎng)基中可見流星似的運(yùn)動(dòng)，若在培養(yǎng)液內(nèi)加人霍亂免疫血清，則霍亂弧菌凝集，運(yùn)動(dòng)停止，稱為制動(dòng)試驗(yàn)。可用于霍亂弧菌的快速早期診斷。
【材料與方法】
1．取病人水樣便6h蛋白胨培養(yǎng)液0.25ml，加適量稀釋的霍亂免疫血清0.25ml，混勻。
2．取上述樣品0.25ml，加0.25ml生理鹽水混勻，作為對(duì)照。
3．置37℃5min，觀察結(jié)果。
【結(jié)果】
凡凝成小塊，動(dòng)力消失者為陽性，反之為陰性。
