阿桔片－嗎啡－高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定阿桔片中嗎啡的含量。

供試品加5%醋酸溶液適量，超聲使嗎啡溶解，濾過，取續(xù)濾液置固相萃取柱上，滴加氨試液適量使柱內(nèi)溶液的pH值約為9，搖勻，待溶劑滴盡后，用水20mL沖洗，用含20%甲醇的5%醋酸溶液洗脫，用5mL量瓶收集洗脫液至刻度，進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長220nm處檢測嗎啡的峰面積，計算出其含量。

1. 乙腈

2. 磷酸二氫鉀溶液(0.05mol/L)

3. 庚烷磺酸鈉水溶液(0.0025mol/L)

4. 甲醇

5. 20%甲醇

6. 5%醋酸溶液

7. 氨水溶液(pH值約為9)

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按嗎啡峰計算應不低于1000。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相：0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液 0.0025mol/L庚烷磺酸鈉水溶液 乙腈=2 2 1

2.2 檢測波長：220nm

2.3 柱溫：室溫

取水適量，滴加氨試液至pH9。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取嗎啡對照品適量，用含20%甲醇的5%醋酸溶液溶解并定量稀釋制成每1mL中約含嗎啡0.06mg的溶液，即為對照品溶液。

3. 供試品溶液的制備

取固相萃取柱一支，依次用甲醇-水(3:1)15mL與水5mL沖洗，再用pH值約為9的氨水溶液沖洗至流出液pH值約為9，待用。取供試品20片，精密稱定，研細，精密稱取約1片量，置磨口錐形瓶中，精密加5%醋酸溶液10mL，超聲處理20分鐘使嗎啡溶解，取出，放至室溫，濾過，精密量取續(xù)濾液1mL，置上述固相萃取柱上，滴加氨試液適量使柱內(nèi)溶液的pH值約為9，搖勻，待溶劑滴盡后，用水20mL沖洗，用含20%甲醇的5%醋酸溶液洗脫，用5mL量瓶收集洗脫液至刻度，搖勻，即為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學工業(yè)出版社，2005版，二部，p.282。