雙黃連口服液—連翹苷的含量—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定雙黃連口服液中連翹苷含量。

本方法適用于由金銀花,黃芩,連翹等精制而成的雙黃連口服液中連翹苷的含量測定。

反相固相萃取法處理樣品,再以反相高效液相色譜作定量分析;色譜條件:ＰＲＯＤＩＧＹＯＤＳ (150ｍｍ×4.6ｍｍ,5μｍ)Ｃ18柱為色譜柱,甲醇 水 冰醋酸=40 60 1為流動相,檢測波長為227ｎｍ。連翹苷色譜峰與其它色譜峰分離良好。

1. 甲醇(色譜純)

2. 冰醋酸(分析純)

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

Ｃ18色譜柱(150ｍｍ×4.6ｍｍ,5μｍ)，Ｓｅｐ-ＰａｋＣ18微柱

2 色譜條件

2.1流動相：甲醇 水 冰醋酸=40 60 1

2.3柱溫：35℃

2.4流速：1.0mL/min

2.5檢測波長：227nm

1.標準溶液的制備

取連翹苷對照品5ｍｇ,精密稱定,加40%甲醇溶液溶解并稀釋至25ｍＬ,為0.2ｍｇ·ｍＬ^-1的對照品溶液,再分別吸取上述溶液適量,各加40%甲醇溶液稀釋為含連翹苷0.1,0.04,0.02,0.01,0.005ｍｇ·ｍＬ^-1的對照品標準溶液。

2. 供試品溶液的制備

取樣品溶液(0009031)5ｍＬ,置50ｍＬ容量瓶中,加甲醇20ｍＬ,搖勻,用水稀釋至刻度,為供試品溶液。取上述溶液,過Ｓｅｐ-ＰａｋＣ18微柱(先以甲醇10ｍＬ過柱活化,再以水10ｍＬ洗滌,然后加幾管空氣擠干,備用),流速為3～5(ｍＬ·ｍｉｎ-1),以2(ｍＬ/管)收集流出液,共收集11管。分別吸取上述對照品溶液20μＬ,注入色譜儀,以流出體積為橫坐標,吸收峰面積為縱坐標作流出曲線,在第5管即第10ｍＬ處連翹苷流出已達平衡。取樣品溶液5ｍＬ,按過微柱,收集第14～16ｍＬ流出液,即得。

1.標準曲線的繪制

分別吸取對照品溶液20μＬ,注入色譜儀中測定,以進樣量為橫坐標,峰面積為縱坐標作回歸曲線。

2. 供試品的測定

取樣品溶液4批,分別制成供試品溶液,依法測定連翹苷含量。

陳勇等.ＲＰ-ＨＰＬＣ測定雙黃連口服液中連翹苷含量.中成藥，2002， 24（10)：760-761