方法名稱： |
消咳喘糖漿－杜鵑素的測定－薄層掃描法 |
應(yīng)用范圍： |
本方法采用薄層掃描法測定消咳喘糖漿中杜鵑素的含量。 本方法適用于中成藥消咳喘糖漿。 |
方法原理： |
供試品用乙醚提取后用乙醇除去水溶性雜質(zhì)，用乙醚提取，于硅膠G板展開后，在薄層掃描儀上進(jìn)行掃描，波長400nm，線性掃描，測供試品和對照品峰面積的積分值，照外標(biāo)兩點(diǎn)法計(jì)算出其含量。 |
試劑： |
1. 乙醚 2. 乙醇 3. 正己烷 4. 醋酸乙酯 5. 甲醇 6. 三氯化鋁 |
儀器設(shè)備： |
1 儀器 1.1 薄層掃描儀 1.2點(diǎn)樣器 一般采用微升毛細(xì)管或與之相應(yīng)的點(diǎn)樣器材。 1.3展開室 可用適合薄層板大小的專用玻璃缸，底部平底或雙槽，蓋子須密閉。 2材料 2.1玻板 用10cm × 10cm、10cm × 15cm、20cm × 10cm或20cm × 20cm的規(guī)格，要求光滑、平整，洗凈后不附水珠，晾干。 2.2吸附劑 硅膠G，其顆粒大小一般要求直徑為10－40µm。 |
試樣制備： |
1. 對照品溶液的制備 精密稱取杜鵑素，加氯仿制成約每1mL含2mg的對照品溶液。 2. 供試品溶液的制備 精密稱取樣品50mL，加乙醚振搖提取3次，每次30mL，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)?次加40％乙醇各20mL，置水浴上溶解，趁熱濾過，用40％乙醇洗滌3次，每次5mL，置水浴上蒸去乙醇，水浴液加乙醚振搖3次，每次30mL，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)勇确露ㄈ萦?mL容量瓶中,作為供試品溶液。 注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一�！熬芰咳 毕抵噶咳◇w積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。 |
操作步驟： |
1.薄層板制備 將吸附劑1份和水3份在研缽中向一方向研磨混合，去除表面的氣泡后，倒入涂布器中，在玻板上平穩(wěn)地移動涂布器進(jìn)行涂布（厚度為0.25－0.5mm)取下涂好薄層的玻板，于室溫下，置水平臺上晾干，在反射光及透射光下檢視，表面應(yīng)均勻，平整，無麻點(diǎn)、無氣泡、無破損及污染，于110℃烘30分鐘，冷卻后立即使用或置干燥箱中備用，或用商品預(yù)制板。 2.點(diǎn)樣 精密吸取樣品溶液5µL與10µL對照品溶液5µL與10µL，分別交叉點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，如用點(diǎn)樣器點(diǎn)樣到薄層板上，一般為圓點(diǎn)，點(diǎn)樣基線距底邊1.0－1.5cm，樣點(diǎn)直徑一般不大于2mm，點(diǎn)間距離可視斑點(diǎn)擴(kuò)散情況，以不影響檢出為宜。點(diǎn)樣時(shí)必須注意勿損傷薄層表面。 3.展開 將點(diǎn)好樣品的薄層板放入展開缸的展開劑中，以正己烷-醋酸乙酯-甲醇（5:5:0.2)為展開劑，展開，取出薄層板，晾干，噴以三氯化鋁試液，在105℃烘5—7min，取出，晾干。 4.含量測定 在薄層掃描儀上，照色譜法進(jìn)行掃描，波長400nm，線性掃描，測定供試品和對照品峰面積積分值，計(jì)算。 用外標(biāo)法測定時(shí)，若對照品各數(shù)據(jù)點(diǎn)在校正曲線上呈一通過原點(diǎn)的直線時(shí)，可用一點(diǎn)法校正，如不通過原點(diǎn)通常宜采用二點(diǎn)法校正，必要時(shí)用多點(diǎn)法校正。 |
參考文獻(xiàn)： |
方紅玲，張鋰. 薄層掃描法測定消咳喘糖漿中杜鵑素的含量. 中國藥業(yè)， 1999，8（4)：26． |
