止喘靈注射液—東莨菪堿的測定—高效液相色譜法 2

本方法采用高效液相色譜法測定止喘靈注射液中東莨菪堿的含量。

本方法適用于止喘靈注射液。

供試品于分液漏斗中，加氨試液調(diào)節(jié)至ph=9，氯仿提取，合并氯仿液，置溫水浴回收氯仿至干，殘渣加甲醇溶解并移容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，經(jīng)離心處理得樣品溶液。取上清液注入液相色譜儀，檢測東莨菪堿的吸收值，計算出其含量。

1. 甲醇（色譜純)

2. 氯仿

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

Spherisorb-C₁₆柱（4.6mm×200mm,5um)。

1.3 蒸發(fā)光散射檢測器

2 色譜條件

2.1 流動相：甲醇 水=78 22

2.3柱溫：25℃

2.4 氣體流量：1.0mL/min

1. 稱取供試品

精密量取本品15mL。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取氫溴酸東莨菪堿對照品15mg，置10mL容量瓶中，加甲醇適量使溶解，并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品貯備。

3. 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

精密量取氫溴酸東莨菪堿對照品貯備溶液0.2，0.4，0.6，0.8，1.0，1.2，1 .4mL，分別置10mL容童瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線的系列濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液。

4.供試品溶液的制備

將供試品置分液漏斗中，加氨試液調(diào)節(jié)至ph=9，氯仿提取3次(25, 20, 20 mL)，用合并氯仿液，置溫水浴上回收氯仿至干，殘渣加甲醇溶解并移至10mL容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，經(jīng)離心處理(1200 r/min)10 min,即得供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

1.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

精密吸取上述標(biāo)準(zhǔn)溶液20uL注入液相色譜儀，按上述色譜條件，測定氫溴酸東莨蓿堿溶液的響應(yīng)值。以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度對峰面積繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行線性回歸，得到回歸方程。

2. 供試品的測定

精密吸取上述供試品溶液上清液20μL注入高效液相色譜儀，測定氫溴酸東莨蓿堿溶液的響應(yīng)值，計算出其含量。

劉建華，楊德柱．HPLC法測定止喘靈注射液中東蓑著堿的含量．中國中醫(yī)藥信息雜志，2004，11（7)：609-610．