方法名稱： |
銀杏葉提取物－萜類內(nèi)酯的測定－高效液相色譜法 |
應用范圍： |
本方法采用高效液相色譜法測定銀杏葉提取物中萜類內(nèi)酯的含量。 本方法適用于銀杏葉經(jīng)加工制成的提取物。 |
方法原理： |
本品加乙酸乙酯提取，合并提取液回收溶劑至干，殘渣加甲醇溶解，搖勻，濾過，續(xù)濾液進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用蒸發(fā)光散射檢測器檢測，計算出其含量。 |
試劑： |
1. 甲醇 2. 正丙醇 3. 四氫呋喃 4. 2%鹽酸溶液 5. 乙酸乙酯 6. 5%醋酸鈉溶液 |
儀器設備： |
1 儀器 1.1 高效液相色譜儀 1.2 色譜柱 十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按白果內(nèi)酯峰計算應不低于2500。 1.3 蒸發(fā)光散射檢測器 2色譜條件 2.1流動相：正丙醇 四氫呋喃 水＝1 15 84 2.2柱溫：室溫 |
試樣制備： |
1. 稱取供試品 精密稱定本品0.15g，為供試品。 2. 對照品溶液的制備 分別精密稱取白果內(nèi)酯對照品、銀杏內(nèi)酯A對照品、銀杏內(nèi)酯B對照品和銀杏內(nèi)酯C對照品適量，加甲醇制成每1mL各含2mg、1mg、1mg、1mg的混合溶液；或精密稱取已標示白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B和銀杏內(nèi)酯C含量的銀杏葉對照提取物0.15g，照供試品溶液的制備方法，同法制成對照提取物溶液。 3. 供試品溶液的制備 取本品約0.15g，精密稱定，加水10mL，置水浴中溫熱使溶散，加2%鹽酸溶液2滴，用乙酸乙酯振搖提取4次（15 mL，10 mL，10 mL，10 mL)，合并提取液，用5%醋酸鈉溶液20 mL洗滌，分取醋酸鈉液，再用乙酸乙酯10 mL洗滌。合并乙酸乙酯提取液及洗液，用水洗滌2次，每次20 mL，分取水液，用乙酸乙酯10 mL洗滌，合并乙酸乙酯液，回收溶劑至干，殘渣用甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至5 mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，續(xù)濾液作為供試品溶液。 |
操作步驟： |
分別精密吸取對照品溶液（或?qū)φ仗崛∥锶芤?5mL、10mL，供試品溶液各5~10mL，注入高效液相色譜儀，用蒸發(fā)光散射檢測器測定白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B和銀杏內(nèi)酯C，計算出其含量。 |
參考文獻： |
中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學工業(yè)出版社，2005版，一部，p281。 |
