方法名稱： |
復方板藍根顆粒--氨基酸含量測定-- HPLC法 |
應用范圍： |
測定復方板藍根顆粒中氨基酸含量 |
方法原理： |
樣品加40%乙醇超聲提取，衍生化后經(jīng)液相色譜儀分離，在360 nm 處測定峰面積，標準曲線法計算氨基酸含量。 |
儀器設備及實驗條件： |
儀器設備 大連依利特公司P200Ⅱ泵， UV200型紫外檢測器，Echrom 98色譜數(shù)據(jù)處理工作站； |
試樣制備： |
標準曲線的制備 分別精密稱取精氨酸（Arg)和脯氨酸（Pro)對照品約10mg，置10mL量瓶中，用40%乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即分別得Arg和Pro 對照品溶液。另精密稱取Arg和Pro對照品31.35mg和33.02mg，置25mL量瓶中，用40%乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得對照品混合溶液。精密吸取對照品混合溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0mL，置10 mL量瓶中，加衍生緩沖液1.0mL，搖勻，加衍生溶液1.0mL，搖勻，避光，于 衍生緩沖溶液的制備 0.5 mol/L NaHCO3 (pH9)(即稱取NaHCO3 4.2g，加水溶解并定容至100mL)。 衍生溶液的制備 精密量取2,4-二硝基氟苯1mL至100mL量瓶中，用乙腈稀釋至刻度。 |
操作步驟： |
按上述方法，制備供試品溶液，注入高效液相色譜儀，測定峰面積，代入標準曲線計算含量。 |
附件： |
點擊下載 (解壓密碼:m.zxtf.net.cn) |
備注： |
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參考文獻： |
萬紹暉,徐玫,王荔等.反相高效液相色譜柱前衍生化法測定復方板藍根顆粒中氨基酸的含量.中藥材.2005,28(7):594-595 |
