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赤芍--赤芍總苷含量測定方法--HPLC法3

  
方法名稱:
  赤芍--赤芍總苷含量測定--HPLC法3
應用范圍:
  測定赤芍總苷中芍藥苷含量
方法原理:
 赤芍經(jīng)水提取得赤芍總苷,赤芍總苷以甲醇稀釋,經(jīng)液相色譜儀分離,在230nm處測定峰面積,外標法計算芍藥苷含量。
儀器設備及實驗條件:
 

儀器設備  高效液相色譜儀:島津LC-10ATVP泵,SPD-10AVP 可見-紫外檢測器; 

  色譜條件  色譜柱:Shim-pack CLC-ODS (島津);流動相:乙腈-水-磷酸(40:60:0.1),流速:1mL/min;柱溫:30 ℃;檢測波長:230 nm。
試樣制備:
 

對照品溶液的制備   精密稱取芍藥苷對照品,置于10 mL 容量瓶中,用甲醇溶解并稀釋至刻度,即為對照品儲備液(2.2mg/mL)。精密吸取此儲備液5mL,置25 mL容量瓶中,用甲醇稀釋至刻度,即得。

供試品溶液的制備   

赤芍總苷的制備  稱取赤芍1kg,每次以10倍水提取,共3次,合并水提液,加入一定量的明膠溶液,沉淀,過濾,濾液加至大孔樹脂柱,先以水洗,至洗出液無色,再以一定濃度的乙醇洗脫,并以HPLC方法測定洗脫液,至芍藥苷基本洗脫完全。將洗脫液均分成甲、乙2份:甲份,減壓薄膜濃縮至濃溶液,并冷凍干燥 ,,得赤芍總苷甲;乙份,過超濾器超濾,得超濾液,將超濾液減壓薄膜濃縮成濃溶液,并冷凍干燥,得赤芍總苷乙。

樣品溶液的制備  分別稱取赤芍總苷甲、乙各0.1g,精密稱定,分別加入甲醇溶解并定容至25 mL,各精密吸取1mL,加甲醇,定容至10 mL,濾過,即得。
操作步驟:
  精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5~10μL,分別注入液相色譜儀,記錄色譜圖和峰面積。按外標法以峰面積計算供試品中芍藥苷的含量。
附件:
  點擊下載 (解壓密碼:m.zxtf.net.cn)
備注:
 
參考文獻:
  陳寅生,姚仲青.膜分離與大孔樹脂吸附技術(shù)在赤芍總苷提取與分離中的應用.南京中醫(yī)藥大學學報. 2006,22(6):406, 408
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