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您現(xiàn)在的位置: 醫(yī)學(xué)全在線 >> 藥學(xué)理論 >> 中藥及天然藥物質(zhì)量控制研究方法 >> 正文:盾葉薯蕷細(xì)胞—薯蕷皂甙元的含量測(cè)定方法-HPLC-UV中藥質(zhì)量控制方法/操作步驟
    

盾葉薯蕷細(xì)胞—薯蕷皂甙元的含量測(cè)定方法-HPLC-UV

  
方法名稱:
  盾葉薯蕷細(xì)胞—薯蕷皂甙元的含量測(cè)定-HPLC-UV
應(yīng)用范圍:
  用于盾葉薯蕷細(xì)胞中薯蕷皂甙元的含量測(cè)定
方法原理:
 本品細(xì)粉加水解液回流提取,經(jīng)正己烷萃取,用1%氫化鈉溶液洗脫至無(wú)色,再用蒸餾水洗至無(wú)色,用無(wú)水乙醇溶解,蒸干,用甲醇定容,經(jīng)液相色譜分離,在208nm處測(cè)定峰面積,以外標(biāo)法計(jì)算含量。
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件:
 

儀器設(shè)備:美國(guó)ALL TECH高效液相色譜儀;UV 檢測(cè)器。

色譜條件:色譜柱:Kromasil C-18 柱(250×4.6mm,5μm) ;柱溫:室溫;檢測(cè)波長(zhǎng):208nm;流速:1.00mL/min;流動(dòng)相:甲醇-水( 95:5)。
試樣制備:
 

對(duì)照品溶液的制備  精密稱取10.2 mg 薯蕷皂甙元標(biāo)準(zhǔn)品用分析純甲醇定容至10 mL,溶液濃度為1.02mg/mL,薯蕷皂甙元濃度為0.969 mg/mL,用0.45 μm 微孔濾膜過濾,作為備用。

供試品溶液的制備  稱取薯蕷細(xì)胞粉末約1g ,精密稱定,置圓底燒瓶?jī)?nèi),加入水解液( 2.5N硫酸70%異丙醇溶液),沸水浴回流提取8h,冷卻,抽濾,除去殘?jiān),濾液用正己烷萃取四次,合并,用1%氫氧化鈉溶液洗脫至無(wú)色,再用蒸餾水洗至中性,減壓蒸干,所得物質(zhì)用無(wú)水乙醇洗出,于100mL燒杯中蒸干,得薯蕷總皂甙元粗提物,將薯蕷總皂甙元粗提物用分析純甲醇定容至10mL,用0.45μm微孔濾膜過濾,備用。
操作步驟:
  精密吸取薯蕷皂甙元對(duì)照液以及供試品溶液20μL,分別注入液相色譜儀,按上述色譜條件測(cè)定峰面積,以外標(biāo)法計(jì)算含量。
附件:
  點(diǎn)擊下載 (解壓密碼:m.zxtf.net.cn)
備注:
 
參考文獻(xiàn):
  顧永明,袁麗紅,李文謙等.RP-HPLC法測(cè)定盾葉薯蕷細(xì)胞中薯蕷皂甙元的含量.天然產(chǎn)物研究與開發(fā).2004.16(4):331~333
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