| 公開(公告)號 | CN1920017A |
| 公開(公告)日 | 2007.02.28 |
| 申請(專利)號 | CN200610122176.X |
| 申請日期 | 2006.09.18 |
| 專利名稱 | 一種尖吻蝮蛇凝血酶的分離純化方法 |
| 主分類號 | C12N9/74(2006.01)I |
| 分類號 | C12N9/74(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 廣東新科迪醫(yī)藥開發(fā)有限公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 徐 丹 |
| 地址 | 510220廣東省廣州市海珠區(qū)前進路上坑直街8號基立大廈首層 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構(gòu) | 廣州市南鋒專利事務(wù)所有限公司 |
| 代理人 | 劉 媖 |
| 國省代碼 | 廣東;44 |
| 主權(quán)項 | 一種尖吻蝮蛇凝血酶的分離純化方法，其特征是包括下述步驟：(1)尖吻蝮蛇粗毒加磷酸緩沖液溶解制成粗毒溶液；(2)層析柱用NaOH溶液去除熱原，用磷酸緩沖液平衡；(3)粗毒溶液上樣，用0→0.1M NaCl磷酸緩沖液梯度冼脫，進行一次純化，收集用促人血漿凝固活性，HPLC和SDS-PAGE鑒定的尖吻蝮蛇凝血酶目標組份；(4)對一次純化的目標組份進行透析；(5)透析后的目標組份進行再次層析，用0→0.1MNaCl磷酸緩沖液梯度洗脫，收集用促人血漿凝固活性、HPLC和SDS-PAGE鑒定的高純度尖吻蝮蛇凝血酶目標組份；(6)按步驟(5)的方法對收集的再次純化目標組份進行第三次純化；(7)對第三次純化后的尖吻蝮蛇凝血酶用Sephadex G-25層析柱脫鹽；(8)對純化后的尖吻蝮蛇凝血酶經(jīng)促人血漿凝固活性，HPLC，SDS-PAGE電泳鑒定。 |
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種尖吻蝮蛇凝血酶的分離純化方法，屬于蛇毒蛋白技術(shù)領(lǐng)域，分離純化的方法是：磷酸緩沖液溶解蛇毒→層析柱去除熱原后平衡→一次純化→透析→再次純化→三次純化→脫鹽→鑒定。本發(fā)明的方法利用磷酸緩沖液對尖吻蝮蛇粗毒進行分離純化，分離純化的尖吻蝮蛇凝血酶純度高(大于95％)，收率較高(可達6～8％)，可以為尖吻蝮蛇毒的有效利用提供一種新途徑。 |
| 國際公布 |
