公開(公告)號
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CN1856570A
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公開(公告)日
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2006.11.01
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申請(專利)號
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CN03827070.6
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申請日期
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2003.07.29
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專利名稱
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使用經(jīng)過加工的臨床樣品通過涂片顯微鏡檢術(shù)、培養(yǎng)和聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)診斷結(jié)核的方法及其試劑盒
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主分類號
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C12N15/10(2006.01)I
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分類號
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C12N15/10(2006.01)I;G01N33/483(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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全印度醫(yī)學(xué)科學(xué)院
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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J·S·蒂亞吉;S·查克拉瓦蒂
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地址
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印度新德里
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頒證日
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國際申請
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2003-07-29 PCT/IB2003/003211
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進(jìn)入國家日期
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2006.03.14
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專利代理機(jī)構(gòu)
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中國國際貿(mào)易促進(jìn)委員會專利商標(biāo)事務(wù)所
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代理人
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趙艷華
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國省代碼
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印度;IN
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主權(quán)項(xiàng)
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一種有效且經(jīng)濟(jì)的加工可用于簡單、快速、安全、靈敏且準(zhǔn)確地診斷細(xì)菌感染的臨床樣品的方法,該方法使用包含由通用樣品加工(USP)溶液(由濃度3至6M的鹽酸胍(GuHCl)、濃度40-60mM且pH 7.3-7.7的Tris-Cl、濃度20-30mM的EDTA、濃度0.3-0.8%的十二烷基肌氨酸鈉、濃度0.1-0.3M的β-巰基乙醇組成)組成的溶液1、由濃度65-70mM且pH6.7-6.8的磷酸鈉組成的溶液2(可選擇地,可以由無菌水替代)、和由濃度0.03-0.08%的Tween 80組成的溶液3、及用于分離DNA的包含濃度8-12%的Chelex 100懸浮液的溶液A、由濃度0.02-0.04%的Triton X-100組成的溶液B和包含濃度0.2-0.4%的Tween 20的溶液C(任選地,可以使用單獨(dú)溶液3或具有0.03-0.1%Triton X 100的溶液3代替溶液A、B和C從含高桿菌載量或低廢料的樣品分離DNA)的組合物,所述方法包括步驟: a.獲得臨床樣品, b.將1.5至2體積的溶液1與樣品混合, c.勻漿混合物并避免起泡, d.向勻漿物添加溶液2或無菌水,之后離心獲得沉淀, e.任選地取決于沉淀體積的減少,用溶液1洗滌沉淀, f.用水洗滌經(jīng)溶液1洗滌的沉淀,和 g.將水洗滌后的沉淀重懸在溶液3中,以得到用于診斷的經(jīng)加工樣品。
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摘要
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本發(fā)明涉及加工臨床樣品以便通過涂片顯微鏡檢術(shù)、培養(yǎng)或PCR診斷細(xì)菌性感染的方法和用于實(shí)施該方法的試劑盒。本發(fā)明還涉及兩組對結(jié)核分枝桿菌的DevR基因具有特異性的引物以及使用所述引物通過PCR篩選結(jié)核病患者的方法。
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國際公布
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2005-02-03 WO2005/010186 英
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