公開(公告)號
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CN1850279A
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公開(公告)日
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2006.10.25
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申請(專利)號
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CN200610033861.5
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申請日期
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2006.02.23
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專利名稱
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一種pcrDNA疫苗及其制備方法和應(yīng)用
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主分類號
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A61K48/00(2006.01)I
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分類號
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A61K48/00(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I;A61P43/00(2006.01)I
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院獸醫(yī)研究所
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發(fā)明(設(shè)計)人
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宋長緒;張洪利;王建龍;黃 忠;蔣智勇
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地址
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510640廣東省廣州市天河區(qū)五山
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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廣州市華學(xué)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司
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代理人
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裘 暉
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國省代碼
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廣東;44
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主權(quán)項
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一種pcrDNA疫苗的制備方法,包括如下步驟: (1)通用載體pcrDNAV或通用載體pcrDNAV-T的構(gòu)建:將擴(kuò)增出的真核生物基因轉(zhuǎn)錄啟動子和擴(kuò)增出的真核生物基因轉(zhuǎn)錄終止信號序列分別克隆至克隆載體中,并保留克隆載體的多克隆位點,獲得通用載體,該通用載體命名為pcrDNAV;或由pcrDNAV進(jìn)一步制備通用載體T載體,命名為pcrDNAV-T; (2)通用載體pcrDNAV或pcrDNAV-T的通用引物的設(shè)計:分別在通用載體pcrDNAV或pcrDNAV-T上的真核生物基因轉(zhuǎn)錄啟動子的上游和真核生物基因轉(zhuǎn)錄終止信號序列的下游設(shè)計通用引物,通用引物擴(kuò)增后pcr產(chǎn)物包含完整的基因表達(dá)元件盒; (3)含有目的基因的重組pcrDNA疫苗通用載體的構(gòu)建:將目的基因按基因克隆的方法克隆入pcrDNAV或pcrDNAV-T載體的多克隆位點中,獲得含有目的基因的重組質(zhì)粒pcrDNAV-Target或pcrDNAV-T-Target; (4)pcrDNA疫苗的擴(kuò)增:以pcrDNAV-Target或pcrDNAV-T-Target為模板,通用引物為引物,采用PCR擴(kuò)增出完整的含有目的基因的基因表達(dá)元件盒即含有完整基因表達(dá)盒的線性DNA片段,所述線性DNA片段即為pcrDNA疫苗。
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摘要
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本發(fā)明公開了一種新型DNA疫苗——pcrDNA疫苗的制備原理和技術(shù)。pcrDNA疫苗是將攜帶有完整的基因表達(dá)元件的PCR產(chǎn)物直接作為DNA疫苗,該DNA疫苗不攜帶任何目的基因以外的無關(guān)基因或核酸序列,具有更好生物安全性;單位質(zhì)量內(nèi)具有更高的效價;該疫苗刺激產(chǎn)生的抗體較用質(zhì)粒制備的DNA疫苗產(chǎn)生抗體更快;采用PCR技術(shù)制備DNA疫苗,工藝簡單,便于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。本發(fā)明還公開了上述pcrDNA疫苗在人和動物中的應(yīng)用,pcrDNA疫苗免疫人和動物,可以起到預(yù)防和治療人和動物的疾病如傳染病、寄生蟲病、腫瘤、營養(yǎng)代謝病及基因缺陷性疾病等及其他應(yīng)用目的。
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國際公布
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