| 公開(kāi)(公告)號(hào) | CN1824775A |
| 公開(kāi)(公告)日 | 2006.08.30 |
| 申請(qǐng)(專(zhuān)利)號(hào) | CN200510016592.7 |
| 申請(qǐng)日期 | 2005.02.25 |
| 專(zhuān)利名稱(chēng) | 重組人血管抑素K1-3的制備工藝及其制品在腫瘤治療藥物中的應(yīng)用 |
| 主分類(lèi)號(hào) | C12N15/12(2006.01)I |
| 分類(lèi)號(hào) | C12N15/12(2006.01)I;C12N15/58(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I;A61K38/17(2006.01)I;A61K38/39(2006.01)I |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人 | 東北師范大學(xué)遺傳與細(xì)胞研究所 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 李玉新;烏 垠;鮑永利;王秀紅;孟祥穎;易靜雯;黃百渠;郝 水 |
| 地址 | 130021吉林省長(zhǎng)春市人民大街5268號(hào) |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專(zhuān)利代理機(jī)構(gòu) | 吉林長(zhǎng)春新紀(jì)元專(zhuān)利代理有限責(zé)任公司 |
| 代理人 | 陳宏偉 |
| 國(guó)省代碼 | 吉林;22 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種制備重組人血管抑素K1-3的制備工藝，該工藝是由基因克隆、工程菌的誘導(dǎo)培養(yǎng)、重組產(chǎn)物的純化和復(fù)性過(guò)程組成，其步驟如下： (1)通過(guò)PCR方法從人肝細(xì)胞中克隆了人纖溶酶原cDNA中Kringle1-3的cDNA片段，在克隆時(shí)對(duì)其N(xiāo)-端和C-端序列進(jìn)行了優(yōu)選。 (2)將這一cDNA片段克隆入自行設(shè)計(jì)構(gòu)建的原核表達(dá)載體pHB中，用重組載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3)，經(jīng)篩選得到高效表達(dá)重組人血管抑素的基因工程重組子。 (3)經(jīng)發(fā)酵培養(yǎng)和誘導(dǎo)表達(dá)重組人血管抑素的菌體經(jīng)超聲裂解、離心洗滌包含體后將其溶解，之后經(jīng)過(guò)陰離子交換層析、調(diào)酸稀釋復(fù)性、陽(yáng)離子交換層析、超濾濃縮及凝膠過(guò)濾等手段純化而得到人重組血管抑素蛋白質(zhì)純品。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種人血管抑素K1-3的制備方法及其制品在抗腫瘤治療中的應(yīng)用。本發(fā)明在對(duì)天然人血管抑素的生成機(jī)制、分子特性和生物學(xué)活性進(jìn)行深入系統(tǒng)研究的基礎(chǔ)上，對(duì)重組人血管抑素的蛋白氨基酸序列進(jìn)行了優(yōu)選，并自行設(shè)計(jì)構(gòu)建了重組人血管抑素的原核高效表達(dá)系統(tǒng)，使血管抑素K1-3的表達(dá)量達(dá)到工程菌可溶性蛋白的50％以上，同時(shí)建立了最適的純化及復(fù)性工藝，使重組人血管抑素的純度達(dá)99.9％以上并能正確折疊。由此獲得的重組人血管抑素K1-3能抑制腫瘤新生血管的生成，并對(duì)多種腫瘤具有治療作用。 |
| 國(guó)際公布 |
