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高中和活性抗腫瘤壞死因子單克隆抗體的可變區(qū)基因及其制備

公開(公告)號 CN1778921A  
公開(公告)日 2006.05.31  
申請(專利)號 CN200510106658.1  
申請日期 2003.11.13  
專利名稱 高中和活性抗腫瘤壞死因子單克隆抗體的可變區(qū)基因及其制備  
主分類號 C12N15/13(2006.01)I  
分類號 C12N15/13(2006.01)I;C07K16/18(2006.01)I;C12N5/18(2006.01)I  
分案原申請?zhí)? 200310105920.1  
優(yōu)先權  
申請(專利權)人 中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學  
發(fā)明(設計)人 金伯泉;劉雪松;楊 琨;朱參勝  
地址 710032陜西省西安市長樂西路17號  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構 西安通大專利代理有限責任公司  
代理人 李鄭建  
國省代碼 陜西;61  
主權項 一種高中和活性抗腫瘤壞死因子單克隆抗體的可變區(qū)基因,其特征在于,基因序列和基酸序列如下: 342ctgcagcagtctgggactgtgctggcaaggcctgggacttccgtg LQQSGTVLARPGTSV 297aagatgtcctgcaaggcttctggctacaacttcaccagctactgg KMSCKASGYNFTSYW 252atgcactgggtaaaacagaggcctggacagggtctagaatggatt MHWVKQRPGQGLEWI 207ggtgctctttttcctggaaacagtgatacgacctacaaggagatg GALFPGNSDTTYKEM 162ttgaagggcagggccaaactgactgcagccacatccgccagtatt LKGRAKLTAATSASI 117gcctacttggagttcagcagcctgacaaatgaggattctgcggtc AYLEFSSLTNEDSAV 72tattactgtgcaagaggcgatttcggcgctatggactactggggc YYCARGDFGAMDYWG 27caagggaccacggtcaccgtctcctca1 QGTTVTVSS  
摘要 本發(fā)明公開了一種高中和活性抗腫瘤壞死因子(TNF)單克隆抗體(D2 mAb)的可變區(qū)基因的制備方法。用重組人TNF免疫BALB/c小,制備一組小鼠抗人TNF單克隆抗體。通過體外阻斷實驗,從中篩選出具有高中和活性的抗人TNF單克隆抗體。克隆該單克隆抗體重鏈可變區(qū)基因,獲得該單克隆抗體重鏈可變區(qū)基因序列和氨基酸序列,確認該基因序列和蛋白序列的惟一性。本發(fā)明選用高中和活性D2雜交瘤細胞株,成功的從其中克隆出重鏈可變區(qū)基因,測序后,得到其獨特的核苷酸序列,編碼該可變區(qū)的基因序列在構建對炎癥、自身免疫性疾病等有治療作用的嵌合抗體和人源化抗體等方面有巨大的潛在價值。  
國際公布  
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