檢測待測標(biāo)本中生存素表達(dá)量的診斷試劑、檢測方法及應(yīng)用
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公開(公告)號
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CN1316037C
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公開(公告)日
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2007.05.16
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申請(專利)號
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CN200310104060.X
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申請日期
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2003.12.19
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專利名稱
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檢測待測標(biāo)本中生存素表達(dá)量的診斷試劑、檢測方法及應(yīng)用
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主分類號
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C12Q1/68(2006.01)I
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分類號
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C12Q1/68(2006.01)I
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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葉尚勉
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發(fā)明(設(shè)計)人
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葉尚勉;葉尚蓉;羅 比
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地址
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610000四川省成都市梓橦街42號3單元7號
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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成都虹橋?qū)＠聞?wù)所
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代理人
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李高峽
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國省代碼
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四川;51
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主權(quán)項
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用于檢測待測標(biāo)本中生存素表達(dá)量的診斷試劑，其特征在于它包含a)包被于載體上的生存素核酸片段；所述生存素核酸片段由以下方法制備：從生存素表達(dá)陽性標(biāo)本中制備總RNA，將RNA逆轉(zhuǎn)錄為生存素表達(dá)陽性標(biāo)本cDNA；以第一引物對為引物，以所述生存素表達(dá)陽性標(biāo)本cDNA為模板，經(jīng)PCR擴(kuò)增制備第一產(chǎn)物；所述第一產(chǎn)物為對應(yīng)于生存素RNA序列的生存素DNA片段；以第二引物對為引物，以所述第一產(chǎn)物為模板，經(jīng)PCR擴(kuò)增制備第二產(chǎn)物，將所述第二產(chǎn)物包被于載體；b)從標(biāo)本中制備RNA和cDNA的試劑；c)從制備的cDNA中擴(kuò)增生存素的PCR引物；以及d)酶反應(yīng)試劑；其中，所述第一引物對分別含有SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2序列；所述第二引物對分別含有SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4序列；所述從制備的cDNA中擴(kuò)增生存素的PCR引物為第三引物對，分別含有SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6序列；所述酶反應(yīng)試劑為抗-熒光素抗體-HRP結(jié)合物。
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摘要
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本發(fā)明涉及以外周血或體液或組織為標(biāo)本，測定其中生存素轉(zhuǎn)錄水平，以生存素的表達(dá)量為標(biāo)準(zhǔn)檢測腫瘤的早期發(fā)生、預(yù)后和監(jiān)測的診斷試劑和方法。包括以下幾種組成成分：包被于載體上的生存素核酸片段；從標(biāo)本中制備RNA和cDNA的試劑；從制備的cDNA中擴(kuò)增生存素的PCR引物；以及酶反應(yīng)試劑。本發(fā)明的診斷試劑成為癌癥早期診斷的理想工具，本發(fā)明為癌癥病人的診斷、預(yù)后和監(jiān)測提供了有效的途徑。
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國際公布
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