公開(公告)號
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CN1268639C
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公開(公告)日
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2006.08.09
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申請(專利)號
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CN97199682.2
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申請日期
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1997.11.14
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專利名稱
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神經(jīng)營養(yǎng)蛋白的純化
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主分類號
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C07K14/475(2006.01)I
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分類號
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C07K14/475(2006.01)I;C07K14/48(2006.01)I;C07K1/20(2006.01)I
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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1996.11.15 US 60/030,838;1997.5.29 US 60/047,855
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申請(專利權(quán))人
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基因技術(shù)股份有限公司
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發(fā)明(設(shè)計)人
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L·E·伯頓;C·H·施梅爾策;J·T·貝克
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地址
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美國加利福尼亞州南舊金山DNA道1號
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頒證日
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國際申請
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1997-11-14 PCT/US1997/021068
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進入國家日期
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1999.05.13
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專利代理機構(gòu)
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北京市柳沈律師事務(wù)所
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代理人
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巫肖南;張平元
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國省代碼
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美國;US
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主權(quán)項
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一種從混合物中分離重組人神經(jīng)營養(yǎng)蛋白或其基因工程形式的方法,該混合物含有其它蛋白以及重組人神經(jīng)營養(yǎng)蛋白的變體,該變體可包括該神經(jīng)營養(yǎng)蛋白的錯折疊變體、蛋白水解加工不正確的變體或重組人神經(jīng)營養(yǎng)蛋白的糖基化變體,該方法包括用疏水作用層析樹脂從混合物的其它蛋白和神經(jīng)營養(yǎng)蛋白變體中分離出神經(jīng)營養(yǎng)蛋白,所述的分離過程包括將混合物加樣到疏水作用層析樹脂上并在能使重組人神經(jīng)營養(yǎng)蛋白與變體分離的條件下用洗脫緩沖液將神經(jīng)營養(yǎng)蛋白從樹脂洗脫下來,其中,所述的加樣到疏水作用層析樹脂上的混合物的pH為5-8,鹽濃度為0.5M-3M,所述的疏水作用層析樹脂具有選自苯基,烷氧基,丙基,丁基,辛基和異戊基的官能基,所述的緩沖液的洗脫條件包括選自如下的條件:降低鹽濃度,改變表面張力,增加相對極性有機溶劑和改變?nèi)芤旱膒H值。
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摘要
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本發(fā)明提供了大規(guī)模純化適用于臨床使用的神經(jīng)營養(yǎng)蛋白(包括成熟NGF)的方法。該方法提供了從各種不需要的誤加工、錯折疊、糖基化或電荷形式中分離出神經(jīng)營養(yǎng)蛋白的手段。另外本發(fā)明還提供了基本上不含這些變體的神經(jīng)營養(yǎng)蛋白(包括成熟的NGF)組合物。
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國際公布
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1998-05-22 WO1998/021234 英
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