| 公開(公告)號 | CN1673370A |
| 公開(公告)日 | 2005.09.28 |
| 申請(專利)號 | CN200510038300.X |
| 申請日期 | 2005.01.28 |
| 專利名稱 | 暫態(tài)表達重組蛋白雞輸卵管生物反應器的制造方法 |
| 主分類號 | C12N15/12 |
| 分類號 | C12N15/12;C12N15/10;C12N15/85;C12N15/87;C12N15/66 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權 | |
| 申請(專利權)人 | 揚州大學 |
| 發(fā)明(設計)人 | 孫懷昌 |
| 地址 | 225009江蘇省揚州市大學南路88號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構 | 揚州市錦江專利事務所 |
| 代理人 | 江平 |
| 國省代碼 | 江蘇;32 |
| 主權項 | 暫態(tài)表達重組蛋白雞輸卵管生物反應器的制造方法，包括以下步驟：a、分子克隆雞卵清蛋白基因調控序列：根據已發(fā)表的雞卵清蛋白基因序列(GenBank登錄號GI：212504)設計引物，以中國狼山雞基因組DNA為模板，用高保真多聚酶鏈式反應(PCR)克隆長度分別為3.0kb的5′和3′雞卵清蛋白基因調控序列；b、構建雞輸卵管特異表達載體：對pHC粘粒載體修飾獲得pHC20載體；對pcDNA3.0真核表達載體修飾獲得pcDNA2.2載體；將雞卵清蛋白基因的5′和3′調控序列同時克隆入pHC20載體，獲得pOV1雞輸卵管特異表達載體；將雞卵清蛋白基因的5′和3′調控序列同時克隆入pcDNA2.2載體，獲得pOV2雞輸卵管特異表達載體；將雞卵清蛋白基因的5′調控序列克隆入pcDNA2.2載體，獲得pOV3雞輸卵管特異表達載體；c、將含人組織激肽釋放酶基因(GenBank登錄號為GI：22027643)的三種雞輸卵管特異表達重組載體與選定的雞體內基因轉染劑25kDa聚乙烯亞胺(PEI)混合，比例為1微克DNA∶2微升PEI，分別經翅靜脈注射產蛋雞，注射劑總量為2～3毫克重組載體，分一次或兩次注射。 |
| 摘要 | 暫態(tài)表達重組蛋白雞輸卵管生物反應器的制造方法，屬于基因工程和生物制藥領域。本發(fā)明的技術方案包括雞卵清蛋白基因調控序列的分子克隆、雞輸卵管高效表達載體的構建及優(yōu)化、基因轉染劑的選擇、重組載體注射方法、劑量和次數(shù)的選擇。與現(xiàn)有的同類技術相比，該發(fā)明不僅具有非手術、經濟、實用等優(yōu)點，而且目的基因的表達水平高、表達維持時間長、表達產物的活性完全。表達在蛋清中的重組蛋白既可以純化后作為防治人、畜疾病的藥物，也可以不經純化直接作為人類的保健品或動物的飼料添加劑進行開發(fā)。 |
| 國際公布 |
