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選擇用于哺乳動物種中核轉(zhuǎn)移的細(xì)胞系的方法

公開(公告)號 CN1650003A  
公開(公告)日 2005.08.03  
申請(專利)號 CN03809092.9  
申請日期 2003.03.25  
專利名稱 選擇用于哺乳動物種中核轉(zhuǎn)移的細(xì)胞系的方法  
主分類號 C12N15/00  
分類號 C12N15/00;C12N15/63;C12N15/85;C12N15/87;C12N15/09;C12N15/70;C12N15/74;C12N5/00;C12N5/02  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán) 2002.4.1 US 60/369,009  
申請(專利權(quán))人 GTC生物治療學(xué)公司  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 D·梅利坎;R·E·巴特勒;W·G·加文  
地址 美國馬薩諸塞州  
頒證日  
國際申請 PCT/US2003/009054 2003.3.25  
進(jìn)入國家日期 2004.10.22  
專利代理機(jī)構(gòu) 中國國際貿(mào)易促進(jìn)委員會專利商標(biāo)事務(wù)所  
代理人 羅菊華  
國省代碼 美國;US  
主權(quán)項(xiàng) 一種通過核轉(zhuǎn)移方法克隆非人哺乳動物的方法,包括(i)獲得待用作供體核來源的期望的分化哺乳動物細(xì)胞;(ii)從與供體核來源細(xì)胞相同的物種的哺乳動物獲得至少一個(gè)卵母細(xì)胞;(iii)將所述至少一個(gè)卵母細(xì)胞去核;(iv)將所述期望的分化細(xì)胞或細(xì)胞核轉(zhuǎn)移至去核的卵母細(xì)胞中;(v)同時(shí)融合和活化細(xì)胞偶聯(lián)體,形成第一轉(zhuǎn)基因胚胎;(vi)活化初次電震擾后被活化的細(xì)胞偶聯(lián)體,產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因胚胎;(vii)培養(yǎng)所述的活化的第一和/或第二轉(zhuǎn)基因胚胎直到超過2細(xì)胞發(fā)育階段;和(viii)將所述第一和/或第二轉(zhuǎn)基因胚胎轉(zhuǎn)移至宿主哺乳動物中,使得該胚胎發(fā)育為胎兒;(ix)其中根據(jù)卵裂和/或融合模式的客觀參數(shù)來選擇待用作細(xì)胞核的期望的分化哺乳動物細(xì)胞系。  
摘要 本發(fā)明提供了數(shù)據(jù)證明包括融合和卵裂指數(shù)(單獨(dú)或組合)的步驟中細(xì)胞系的融合性能是選擇將成功用于核轉(zhuǎn)移或顯微注射程序的細(xì)胞系的一種方法。選擇細(xì)胞系的這個(gè)技術(shù)和方法提供了用于在各種哺乳動物非人種(包括山羊、豬、嚙齒動物、靈長目、子和牛)中產(chǎn)生活后代的能夠核轉(zhuǎn)移的活化和融合胚胎的制備方法的另外替代方法和改進(jìn)。  
國際公布 WO2003/085105 英 2003.10.16  
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