| 公開(公告)號(hào) | CN1657628A |
| 公開(公告)日 | 2005.08.24 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN200410039594.3 |
| 申請(qǐng)日期 | 2004.02.19 |
| 專利名稱 | 一種高效篩選目的蛋白的表達(dá)載體，其制備方法及用途 |
| 主分類號(hào) | C12N15/64 |
| 分類號(hào) | C12N15/64;C12N15/31;C12N15/67;C12N15/62 |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 陳立勇;解志剛;郭寧;沈倍奮 |
| 地址 | 100850北京市海淀區(qū)太平路27號(hào) |
| 頒證日 | |
| 國際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | |
| 代理人 | |
| 國省代碼 | 北京;11 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種真核表達(dá)載體，其特征在于該載體是含有anti-erbB2-scFv-Fc與IL-2基因的融合基因及新霉素抗性基因突變體的雙順反子表達(dá)載體。 |
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種高效篩選目的蛋白的表達(dá)載體，其制備方法及用途。發(fā)明人通過在含有CMV啟動(dòng)子和dhfr擴(kuò)增系統(tǒng)的真核表達(dá)載體中引入一個(gè)內(nèi)部核糖體進(jìn)入位點(diǎn)，將anti-erbB2-scFv-Fc基因與IL-2的融合基因與新霉素抗性基因連接。利用PCR方法對(duì)Neo基因進(jìn)行點(diǎn)突變，構(gòu)建成表達(dá)載體pCMV-HFI-mNeo。本載體特點(diǎn)在于通過引入IRES使融合蛋白基因和Neo基因在同一個(gè)啟動(dòng)子啟動(dòng)下共表達(dá)；通過對(duì)Neo基因的點(diǎn)突變?nèi)趸疦eo基因表達(dá)產(chǎn)物活性，從而提高了陽性表達(dá)克隆的篩選效率，大大減少了篩選工作量，獲得了目的基因的穩(wěn)定高效表達(dá)克隆。 |
| 國際公布 |
