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一種純化血紅蛋白的方法

公開(kāi)(公告)號(hào) CN1197875C  
公開(kāi)(公告)日 2005.04.20  
申請(qǐng)(專(zhuān)利)號(hào) CN02145913.4  
申請(qǐng)日期 2002.10.23  
專(zhuān)利名稱(chēng) 一種純化血紅蛋白的方法  
主分類(lèi)號(hào) C07K14/805  
分類(lèi)號(hào) C07K14/805;C07K1/14  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人 中國(guó)科學(xué)院過(guò)程工程研究所  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 蘇志國(guó);路秀玲;金業(yè)濤;趙東旭  
地址 100080 北京市海淀區(qū)中關(guān)村北二條1號(hào)  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專(zhuān)利代理機(jī)構(gòu) 北京律誠(chéng)同業(yè)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司  
代理人 王鳳華  
國(guó)省代碼 北京;11  
主權(quán)項(xiàng) 一種純化血紅蛋白的方法,包括如下步驟:(1)床層平衡:用pH值為5.0~8.0的平衡液緩沖液以2~5cm/min的線流速自下而上平衡擴(kuò)張床吸附介質(zhì),直至擴(kuò)張床層穩(wěn)定后;其中擴(kuò)張床吸附介質(zhì)為粒徑分布在50~300μm之間的陽(yáng)離子交換介質(zhì)或金屬親和層析介質(zhì);(2)進(jìn)料吸附:將紅細(xì)胞裂解液pH值調(diào)成5.0~8.0,以2~5cm/min的線流速自下而上進(jìn)料;(3)淋洗:進(jìn)料完畢后,保持床層擴(kuò)張狀態(tài),用pH值為5.0~8.0的平衡液緩沖液以2~5cm/min的線流速自下而上洗去滯留在床層中未結(jié)合的蛋白、細(xì)胞碎片等雜質(zhì)和其它與介質(zhì)結(jié)合不牢的物質(zhì);(4)改變pH值洗脫:將床層改為固定床操作,在2~20℃溫度情況下,用pH值為6.0~8.0的平衡緩沖液以2~5cm/min的線流速自上而下流過(guò)床層,收集樣品,整個(gè)純化過(guò)程控制在2~20℃。  
摘要 本發(fā)明提供了一種純化血紅蛋白的方法。本方法采用擴(kuò)張床吸附技術(shù),以自下而上的進(jìn)料方式使層析介質(zhì)膨脹擴(kuò)張,細(xì)胞碎片、雜蛋白等雜質(zhì)直接通過(guò)床層,血紅蛋白被介質(zhì)吸附,實(shí)現(xiàn)從人或牛、豬、羊等動(dòng)物的血紅細(xì)胞裂解液中直接純化血紅蛋白。該技術(shù)省去離心或過(guò)濾去除碎片步驟,僅一步操作產(chǎn)品即達(dá)電泳純,操作時(shí)間短,提取收率高,產(chǎn)品活性損失小,是一種簡(jiǎn)捷、高效、適合工業(yè)化生產(chǎn)的天然血紅蛋白制備方法。  
國(guó)際公布  
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