公開(公告)號(hào)
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CN1208466C
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公開(公告)日
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2005.06.29
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN03138975.9
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申請(qǐng)日期
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2003.08.04
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專利名稱
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一種具有抗腫瘤活性的硫酸半乳低聚糖的制備方法
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主分類號(hào)
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C12P19/00
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分類號(hào)
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C12P19/00;A61P35/00;C07H3/06
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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中國海洋大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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牟海津;江曉路;管華詩
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地址
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266003 山東省青島市魚山路5號(hào)
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頒證日
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國際申請(qǐng)
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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青島海昊知識(shí)產(chǎn)權(quán)事務(wù)所有限公司
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代理人
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崔清晨
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國省代碼
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山東;37
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主權(quán)項(xiàng)
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一種具有抗腫瘤活性的硫酸半乳低聚糖的制備方法,包括配制κ-卡拉膠底物,加入κ-卡拉膠酶粉,進(jìn)行酶解反應(yīng),反應(yīng)后用沸水浴加熱使酶失活,離心去除酶解抗性片段,用乙醇沉淀收集可溶性酶解低聚糖,濃縮干燥,磺化修飾后,經(jīng)乙醇反復(fù)洗滌和真空抽濾并干燥,其特征是所用的κ-卡拉膠酶由海洋噬纖維菌產(chǎn)生,在所述的濃縮干燥后對(duì)酶解低聚糖進(jìn)行磺化修飾;所述的酶解反應(yīng)條件為5單位κ-卡拉膠酶粉加入到含2gκ-卡拉膠的00ml蒸餾水中,于32℃50r/min振蕩反應(yīng)2h,沸水浴加熱并冷卻后,3000r/min離心7min,向上清液加入倍體積的乙醇去除分子量大的組分,可溶性組分于60℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮,然后加入3倍體積的乙醇使低聚糖得到沉淀,經(jīng)70℃烘干后得到卡拉膠酶解片段;所述的磺化修飾條件為冰鹽浴條件下加5ml甲酰胺與5ml氯磺酸反應(yīng),于水浴中加入5g烘干的卡拉膠低聚糖制品,升溫至68℃,反應(yīng)2-4h。
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摘要
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一種具有抗腫瘤活性的硫酸半乳低聚糖的制備方法,包括配制κ-卡拉膠底物,加入κ-卡拉膠酶粉,反應(yīng)后用沸水浴加熱使酶失活,離心去除酶解抗性片段,用乙醇沉淀收集可溶性酶解低聚糖,濃縮干燥,磺化衍生后,經(jīng)乙醇反復(fù)洗滌和真空抽濾并干燥,其特征是所用的κ-卡拉膠酶由海洋微生物產(chǎn)生,在所述的濃縮干燥后對(duì)酶解低聚糖進(jìn)行化學(xué)修飾。本發(fā)明將酶法降解和化學(xué)修飾相結(jié)合,其優(yōu)點(diǎn)是制備過程簡單、產(chǎn)物得率高、質(zhì)量穩(wěn)定、在制備過程中活性基團(tuán)不受破壞,并且該產(chǎn)品具有抗腫瘤活性,具備抗腫瘤藥物的開發(fā)潛力。
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國際公布
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