公開(公告)號(hào)
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CN1579553A
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公開(公告)日
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2005.02.16
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN200410018528.8
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申請(qǐng)日期
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2004.05.18
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專利名稱
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II型豬圓環(huán)病毒核酸疫苗的制備方法及其應(yīng)用
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主分類號(hào)
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A61K48/00
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分類號(hào)
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A61K48/00;A61K39/12;A61P31/12
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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浙江大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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周繼勇;申會(huì)剛;郭軍慶
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地址
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310027浙江省杭州市西湖區(qū)浙大路38號(hào)
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頒證日
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國(guó)際申請(qǐng)
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進(jìn)入國(guó)家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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杭州求是專利事務(wù)所有限公司
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代理人
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張法高
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國(guó)省代碼
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浙江;33
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主權(quán)項(xiàng)
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一種豬II型圓環(huán)病毒核酸疫苗的制備方法,其特征在于方法的步驟為:1)設(shè)計(jì)特異性引物,以PCV2杭州株(HZ0201)的基因組為模板,通過(guò)PCR的方法克隆PCV-2的ORF1、ORF2、ORF3和ORF4基因,與pCI-neo構(gòu)建為真核表達(dá)載體,以PCV2ORF1、ORF2、ORF3、ORF4基因作為PCV2核酸疫苗的基本組成部分;2)分離豬外周血單個(gè)核細(xì)胞,通過(guò)RT-PCR方法克隆豬IFN、IL-2和IL-4基因,并與pCI-neo構(gòu)建為真核表達(dá)載體,以豬IFN-γ、IL-2、IL-4基因作為基因佐劑;3)以上述重組載體為基礎(chǔ),分別構(gòu)建PCV2ORF2與PCV2的其它基因或與豬細(xì)胞因子基因的融合表達(dá)載體。
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摘要
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本發(fā)明公開了一種II型豬圓環(huán)病毒核酸疫苗的制備方法及其應(yīng)用。制備方法為:1)設(shè)計(jì)特異性引物,以PCV2杭州株(HZ0201)的基因組為模板,通過(guò)PCR的方法克隆PCV-2的ORF1、ORF2、ORF3和ORF4基因,與pCI-neo構(gòu)建為真核表達(dá)載體;2)分離豬外周血單個(gè)核細(xì)胞,通過(guò)RT-PCR方法克隆豬IFN、IL-2和IL-4基因,并與pCI-neo構(gòu)建為真核表達(dá)載體;3)以上述重組載體為基礎(chǔ),分別構(gòu)建PCV2 ORF2與PCV2的其它基因或與豬細(xì)胞因子基因的融合表達(dá)載體;本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn):(1)不需培養(yǎng)病毒,生產(chǎn)周期短;(2)不需細(xì)胞培養(yǎng),有效防止其它豬源病毒的污染;(3)不表達(dá)對(duì)機(jī)體有害的致病蛋白,安全性高;(4)可同時(shí)激活體液免疫與細(xì)胞免疫應(yīng)答。
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國(guó)際公布
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