| 公開(公告)號(hào) | CN1563377A |
| 公開(公告)日 | 2005.01.12 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN200410017218.4 |
| 申請(qǐng)日期 | 2004.03.25 |
| 專利名稱 | 一種獲得目的mRNA的方法 |
| 主分類號(hào) | C12N15/10 |
| 分類號(hào) | C12N15/10;C12N15/70;C12N15/66;C12Q1/68;G01N33/50 |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 華東理工大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 楊忠;趙建龍;馬昱澍;肖君華;王錦之;魏東芝 |
| 地址 | 200237上海市梅隴路130號(hào) |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 中原信達(dá)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 |
| 代理人 | 羅大忱 |
| 國(guó)省代碼 | 上海;31 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種獲得目的mRNA的方法，其特征在于該方法包括如下步驟：①在目的基因的3’末端引入oligo(dT)序列，構(gòu)建表達(dá)載體；②表達(dá)載體轉(zhuǎn)化到大腸桿菌中；③轉(zhuǎn)化后的大腸桿菌總RNA提取；④mRNA從總RNA中的分離純化；其中oligo(dT)的數(shù)目為20-40。 |
| 摘要 | 本發(fā)明提供了一種獲得目的mRNA的方法。該方法是將目的基因進(jìn)行改造，在其3’末端引入oligo(dT)序列，然后分別在5’端和3’端加上限制性內(nèi)切酶識(shí)別序列，并與載體結(jié)合，轉(zhuǎn)化到大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞中，促使其高表達(dá)，提取大腸桿菌的總RNA，然后用oligo(dT)纖維素進(jìn)行分離純化，獲得所需的目的mRNA。本發(fā)明提供的方法，可以方便地獲得高純度的所需的mRNA片段，用于相關(guān)基因PCR檢測(cè)試劑盒的開發(fā)。 |
| 國(guó)際公布 |
