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三維立體培養(yǎng)和誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細胞成軟骨細胞的方法

公開(公告)號 CN1563364A  
公開(公告)日 2005.01.12  
申請(專利)號 CN200410017588.8  
申請日期 2004.04.09  
專利名稱 三維立體培養(yǎng)和誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細胞成軟骨細胞的方法  
主分類號 C12N5/08  
分類號 C12N5/08;C12N11/02  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 華東理工大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計)人 周燕;譚文松;蔣丹丹;胡靜波  
地址 200237上海市梅隴路130號  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構(gòu) 中原信達知識產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司  
代理人 羅大忱  
國省代碼 上海;31  
主權(quán)項 一種三維立體培養(yǎng)和誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細胞成軟骨細胞的方法,其特征在于,包括如下步驟:(1)將骨髓間充質(zhì)干細胞在預(yù)置有培養(yǎng)基和微載體的懸浮培養(yǎng)裝置中懸浮培養(yǎng),在攪拌下擴增骨髓間充質(zhì)干細胞;所說的培養(yǎng)基為含有2%~20%體積百分比胎牛血清的α-MEM;所說的微載體為Cytodex3微載體;(2)然后將成軟骨細胞誘導(dǎo)培養(yǎng)基加入含收獲的Cytodex3微載體以及在其上生長的骨髓間充質(zhì)干細胞的培養(yǎng)裝置中,對骨髓間充質(zhì)干細胞進行聚團成軟骨細胞誘導(dǎo);成軟骨細胞誘導(dǎo)培養(yǎng)基以DMEM為基礎(chǔ),添加濃度為1~10μg/ml的胰島素、1~20ng/ml的轉(zhuǎn)化生長因子β3、10~150nmol/L的地塞米松、10~100mg/ml的抗壞血酸磷酸酯、10~100mg/ml的脯酸、0.5~5mmol/L的丙酮酸鈉。  
摘要 本發(fā)明公開了一種三維立體培養(yǎng)和誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細胞成軟骨細胞的方法,包括如下步驟:1.將骨髓間充質(zhì)干細胞在預(yù)置有培養(yǎng)基和微載體的懸浮培養(yǎng)裝置中懸浮培養(yǎng),在攪拌下擴增骨髓間充質(zhì)干細胞;2.然后將成軟骨細胞誘導(dǎo)培養(yǎng)基加入含收獲的Cytodex 3.微載體以及在其上生長的骨髓間充質(zhì)干細胞的培養(yǎng)裝置中,對骨髓間充質(zhì)干細胞進行聚團成軟骨細胞誘導(dǎo)。本發(fā)明的方法可在短時間內(nèi)一次獲得大量的軟骨細胞,降低了污染幾率,減少了細胞損傷,有利于細胞間營養(yǎng)物質(zhì)的傳遞。誘導(dǎo)完成后可直接將該復(fù)合物移植入體內(nèi)進行軟骨缺損修復(fù)實驗或為科學(xué)研究提供充足的種子細胞來源。  
國際公布  
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