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非抗性篩選DNA疫苗載體及其構(gòu)建方法

公開(公告)號 CN1546669A  
公開(公告)日 2004.11.17  
申請(專利)號 CN200310112640.3  
申請日期 2003.12.10  
專利名稱 非抗性篩選DNA疫苗載體及其構(gòu)建方法  
主分類號 C12N15/63  
分類號 C12N15/63;C12N15/31;C12N15/12;A61K48/00  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 揚州大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計)人 焦新安;張曉明;潘志明;張曉榮;劉秀梵  
地址 225009江蘇省揚州市大學(xué)南路88號揚州大學(xué)生物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院  
頒證日  
國際申請  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 揚州市錦江專利事務(wù)所  
代理人 江平  
國省代碼 江蘇;32  
主權(quán)項 非抗性篩選DNA疫苗載體,其特征在于該載體全長3114bp,其序列為:gactcttcgcgatgtacgggccagatatacgcgttgacattgattattgactagttatta60atagtaatcaattacggggtcattagttcatagcccatatatggagttccgcgttacata120acttacggtaaatggcccgcctggctgaccgcccaacgacccccgcccattgacgtcaat180aatgacgtatgttcccatagtaacgccaatagggactttccattgacgtcaatgggtgga240ctatttacggtaaactgcccacttggcagtacatcaagtgtatcatatgccaagtacgcc300ccctattgacgtcaatgacggtaaatggcccgcctggcattatgcccagtacatgacctt360atgggactttcctacttggcagtacatctacgtattagtcatcgctattaccatggtgat420gcggttttggcagtacatcaatgggcgtggatagcggtttgactcacggggatttccaag480tctccaccccattgacgtcaatgggagtttgttttggcaccaaaatcaacgggactttcc540aaaatgtcgtaacaactccgccccattgacgcaaatgggcggtaggcgtgtacggtggga600ggtctatataagcagagctctctggctaactagagaacccactgcttactggcttatcga660aattaatacgactcactatagggagacccaagctggctagcgtttaaacttaagcttggt720accgagctcggatccactagtccagtgtggtggaattctgcagatatccagcacagtggc780ggccgctcgagtctagagggcccgtttaaacccgctgatcagcctcgactgtgccttcta840gttgccagccatctgttgtttgcccctcccccgtgccttccttgaccctggaaggtgcca900ctcccactgtcctttcctaataaaatgaggaaattgcatcgcattgtctgagtaggtgtc960attctattctggggggtggggtggggcaggacagcaagggggaggattgggaagacaata1020gcaggcatgctggggatgcggtgggctctatggcttctactgggcggttttatggacagc1080aagcgaaccggaattgccagctggcacatctctttgcaggaaaaaaacgctatgaaaaat1140gttggttttatcggctggcgcggaatggtcggctctgttctcatgcaacgcatggtagag1200gagcgcgatttcgacgctattcgccctgttttcttttctacctcccagtttggacaggcg1260gcgcccaccttcggcgacacctccaccggcacgctacaggacgcttttgatctggatgcg1320ctaaaagcgctcgatatcatcgtgacctgccagggcggcgattataccaacgaaatttat1380ccaaagctgcgcgaaagcggatggcagggttactggattgatgcggcttctacgctgcgc1440atgaaagatgatgccattattattctcgacccggtcaaccaggacgtgattaccgacggc1500ctgaacaatggcgtgaagacctttgtgggcggtaactgtaccgttagcctgatgttgatg1560tcgctgggcggtctctttgcccataatctcgttgactgggtatccgtcgcgacctatcag1620gccgcctccggcggcggcgcgcgccatatgcgcgagctgttaacccagatgggtcagttg1680tatggccatgtcgccgatgaactggcgacgccgtcttccgcaattcttgatattgaacgc1740aaagttacggcattgacccgcagcggcgagctgccggttgataactttggcgtaccgctg1800gcgggaagcctgatcccctggatcgacaaacagctcgataacggccagagccgcgaagag1860tggaaaggccaggcggaaaccaacaagattctcaatactgcctctgtgattccggttgat1920ggtttgtgtgtgcgcgtcggcgcgctgcgctgtcacagccaggcgttcaccatcaagctg1980aaaaaagaggtatccattccgacggtggaagaactgctggcggcacataatccgtgggcg2040aaagtggtgccgaacgatcgtgatatcactatgcgcgaattaaccccggcggcggtgacc2100ggcacgttgactacgccggttggtcgtctgcgtaagctgaacatggggccagagttcttg2160tcggcgtttaccgtaggcgaccagttgttatggggcgccgccgagccgctgcgtcgaatg2220ctgcgccagttggcgtagtggctattgcagcgcttatcgggcctgcgtgtggttctgtag2280gccggataaggcgcgtcagcgccgccatccggcggggaaatttgtgttaaaccaggggtg2340catcgtcaccctttttttgcgtaatacaggagtaaacgcagatgtcatgaccaaaatccc2400ttaacgtgagttttcgttccactgagcgtcagaccccgtagaaaagatcaaaggatcttc2460ttgagatcctttttttctgcgcgtaatctgctgcttgcaaacaaaaaaaccaccgctacc2520agcggtggtttgtttgccggatcaagagctaccaactctttttccgaaggtaactggctt2580cagcagagcgcagataccaaatactgtccttctagtgtagccgtagttaggccaccactt2640caagaactctgtagcaccgcctacatacctcgctctgctaatcctgttaccagtggctgc2700tgccagtggcgataagtcgtgtcttaccgggttggactcaagacgatagttaccggataa2760ggcgcagcggtcgggctgaacggggggttcgtgcacacagcccagcttggagcgaacgac2820ctacaccgaactgagatacctacagcgtgagctatgagaaagcgccacgcttcccgaagg2880gagaaaggcggacaggtatccggtaagcggcagggtcggaacaggagagcgcacgaggga2940gcttccagggggaaacgcctggtatctttatagtcctgtcgggtttcgccacctctgact3000tgagcgtcgatttttgtgatgctcgtcaggggggcggagcctatggaaaaacgccagcaa3060cgcggcctttttacggttcctgggcttttgctggccttttgctcacatgttctt。  
摘要 本發(fā)明涉及一種DNA疫苗載體以及構(gòu)建的方法,將擴(kuò)增的傷寒沙門氏菌asd用pVUII和PagI雙酶切;用pVUII和PagI雙酶切質(zhì)粒pVAX1,去除卡那霉素抗性基因;然后將asd基因與去除卡那霉素抗性基因的載體進(jìn)行連接,構(gòu)成長度為3114bp的新型非抗性篩選DNA疫苗載體。本發(fā)明采用染色體-質(zhì)粒平衡致死系統(tǒng)代替抗生素抗性基因來作為DNA疫苗擴(kuò)增的選擇性標(biāo)記,構(gòu)建新型非抗性篩選DNA疫苗載體,從而避免了抗生素抗性基因的潛在性危險問題。  
國際公布  
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