公開(公告)號
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CN1154739C
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公開(公告)日
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2004.06.23
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申請(專利)號
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CN97198009.8
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申請日期
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1997.07.24
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專利名稱
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利用腐質(zhì)霉屬微生物大量生產(chǎn)蛋白南或肽的體系
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主分類號
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C12N15/74
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分類號
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C12N15/74;C12N1/21;C12P21/02;C07K14/37
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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1996.7.24 JP 195070/1996
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申請(專利權(quán))人
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明治制果株式會社
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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守屋達(dá)樹;青柳薰;隅田奈緒美;渡邊學(xué)
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地址
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日本東京都
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頒證日
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2004.06.23
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國際申請
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PCT/JP1997/002560 1997.7.24
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進(jìn)入國家日期
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1999.03.17
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專利代理機(jī)構(gòu)
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中國國際貿(mào)易促進(jìn)委員會專利商標(biāo)事務(wù)所
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代理人
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隗永良
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國省代碼
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日本;JP
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主權(quán)項(xiàng)
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表達(dá)載體,包含含有啟動子、信號序列、以及終止子序列的調(diào)控序列,該序列來自傲慢腐質(zhì)霉(Humicola insolens)的纖維素酶NCE2基因的調(diào)控序列,其中啟動子序列是位于質(zhì)粒pEGD01和pMKD01中序列2的第389號核苷酸的NCE2基因的起始密碼子到Pst I位點(diǎn)區(qū)域的序列,為位于所述起始密碼子上游的1.4kbp區(qū)域的序列或是保持高啟動子活性的其變化序列;終止子序列來自傲慢腐質(zhì)霉纖維素酶NCE1和/或NCE2基因;以及編碼目的蛋白質(zhì)的核苷酸序列,該序列與上述調(diào)控序列可操作地連接。
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摘要
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本發(fā)明給出了在屬于腐質(zhì)霉Humicola屬的微生物,尤其是在Humicola insolens中可能大量生產(chǎn)蛋白質(zhì)的表達(dá)體系,特別是給出了宿主-載體體系以及利用該體系制造蛋白質(zhì)的方法。構(gòu)建含有來自Humicola insolens的纖維素酶NCE1基因或NCE2基因的調(diào)控序列,即啟動子、信號序列、以及終止子的表達(dá)載體,并利用該載體。例如,利用該表達(dá)載體,于Humicola insolens中可以極高效率地生產(chǎn)纖維素酶NCE4,每升培養(yǎng)液可生產(chǎn)4.5g以上的NCE4。
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國際公布
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WO1998/003667 日 1998.1.29
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