公開(公告)號 | CN1154733C |
公開(公告)日 | 2004.06.23 |
申請(專利)號 | CN97115392.2 |
申請日期 | 1997.08.05 |
專利名稱 | 改進的熱穩(wěn)定DNA聚合酶 |
主分類號 | C12N15/52 |
分類號 | C12N15/52;C12N9/00;C12Q1/25;C12Q1/68 |
分案原申請?zhí)? | |
優(yōu)先權(quán) | 1996.8.6 US 023376 |
申請(專利權(quán))人 | 霍夫曼-拉羅奇有限公司 |
發(fā)明(設(shè)計)人 | 戴維·H·蓋爾芬德;莉薩·V·卡爾曼 |
地址 | 瑞士巴塞爾 |
頒證日 | 2004.06.23 |
國際申請 | |
進入國家日期 | |
專利代理機構(gòu) | 北京市柳沈律師事務(wù)所 |
代理人 | 黃益芬 |
國省代碼 | 瑞士;CH |
主權(quán)項 | 一種重組熱穩(wěn)定DNA聚合酶,其特征在于該聚合酶是天然產(chǎn)生的熱穩(wěn)定DNA聚合酶的突變體形式,其中所述天然產(chǎn)生的熱穩(wěn)定DNA聚合酶含有序列2所示的氨基酸序列基序SerGlnIleGluLeuArgXaa,其中這一序列基序中第7位的“Xaa”是纈氨酸殘基Val或異亮氨酸殘基Ile;其中所述突變體形式在所述序列基序的第4位包含除谷氨酸殘基Glu以外的氨基酸;并且其中所述突變體形式與所述天然產(chǎn)生的熱穩(wěn)定DNA聚合酶相比,表現(xiàn)出對摻入的非常規(guī)核苷酸的識別排斥減少。 |
摘要 | 本發(fā)明提供了熱穩(wěn)定DNA聚合酶,其含有氨基酸序列Ser Gln Ile XaaLeu Arg Xaa(序列1),其中該序列的第4位的“Xaa”是任意氨基酸殘基,但不是谷氨酸殘基(Glu),優(yōu)選為甘氨酸殘基,該序列第7位的“Xaa”是一種纈氨酸殘基(Val)或一種異亮氨酸(Ile)。本發(fā)明還提供了可編碼所述聚合酶的核酸、含有上述核酸的載體和宿主細胞、以及用于DNA測序反應(yīng)的組合物、包括上述聚合酶在內(nèi)的試劑盒和測序方法。 |
國際公布 |