| 公開(公告)號(hào) | CN1149284C |
| 公開(公告)日 | 2004.05.12 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN99111511.2 |
| 申請(qǐng)日期 | 1999.08.18 |
| 專利名稱 | 以多元共聚多孔微珠為載體的固定化青霉素酰化酶及制法 |
| 主分類號(hào) | C12N11/08 |
| 分類號(hào) | C12N11/08 |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 中國(guó)科學(xué)院化工冶金研究所 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 叢威;劉建國(guó);歐陽藩 |
| 地址 | 100080 北京市海淀區(qū)中關(guān)村北二條1號(hào) |
| 頒證日 | 2004.05.12 |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 上海智信專利代理有限公司 |
| 代理人 | 高存秀 |
| 國(guó)省代碼 | 北京;11 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種以多元共聚多孔微珠為載體的固定化青霉素�；�，該固定化青霉素酰化酶顆粒直徑為80-400μm，濕密度為1.02-1.10g/cm3；它依下列制備方法獲得：(1)微珠制備：將單體A、單體B、單體C、單體D充分混合；每100g上述混合單體，加入引發(fā)劑0.8-1.3g，致孔劑6-30ml和200#汽油0-20ml；在單體總體積3-4倍的含有1-4％wt的明膠及1％wtMg(OH)2的懸浮體系中進(jìn)行聚合反應(yīng)，40℃開始緩慢升溫，升溫速率為0.45-0.65℃/min，65-70℃聚合5小時(shí)，70℃以上同化6-10小時(shí)，過篩，用大量的水洗滌，然后用丙酮浸泡，洗去致孔劑，得到多孔型微珠；(2)表面改性：將上述微珠風(fēng)干，加入過量的含3-5％wtNaOH的甲醇溶液，18-25℃反應(yīng)24-48小時(shí)后，抽濾，用丙酮洗滌三次，即制得固定化酶用的載體；(3)載體活化：根據(jù)活化試劑的種類采用不同的活化工藝條件；(4)掛酶：按每0.2-0.4g載體，以載體濕重計(jì)算，加入800單位的青霉素�；该敢旱谋壤�19-22℃反應(yīng)36小時(shí)后再加入等量的青霉素�；�，繼續(xù)反應(yīng)12-24小時(shí)后停止；產(chǎn)物依次以24％wt的(NH4)2SO4或0.5M的NaCl溶液和pH8.0的磷酸緩沖液洗滌，得到以多元共聚多孔微珠為載體的固定化青霉素酰化酶。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種以多元共聚多孔微珠為載體的固定化青霉素�；讣爸品�。本發(fā)明用懸浮聚合法制出多元共聚多孔微珠，經(jīng)過表面改性和活化，將青霉素�；附Y(jié)合上去而制成。本發(fā)明制備的固定化青霉素�；割w粒直徑為80-400μm，濕密度為1.02-1.10g/cm3；強(qiáng)度高，不易染菌，適合于反應(yīng)器操作；其活性比用瓊脂糖6B微珠制備的固定化酶活性高5-10倍，比用Eupergit C制備的固定化酶活性高2-3倍，綜合性能優(yōu)于已有的產(chǎn)品；成本低，制備方法簡(jiǎn)單，適于工業(yè)生產(chǎn)。 |
| 國(guó)際公布 |
