公開(公告)號
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CN1148452C
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公開(公告)日
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2004.05.05
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申請(專利)號
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CN99116862.3
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申請日期
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1999.09.10
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專利名稱
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分泌性融合蛋白的酵母表達
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主分類號
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C12N15/62
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分類號
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C12N15/62;C12N15/27;C12N15/24;C12N15/64;C12N15/81;//(C12N15/62,C12R1:84)
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權
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申請(專利權)人
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上海兆安醫(yī)學科技有限公司
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發(fā)明(設計)人
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樓覺人
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地址
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200021 上海市淮海中路283號香港廣場南座2005室
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頒證日
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2004.05.05
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國際申請
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進入國家日期
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專利代理機構
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上海專利商標事務所
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代理人
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徐迅
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國省代碼
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上海;31
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主權項
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一種表達分泌性的粒細胞巨噬細胞集落刺激因子和白細胞介素3的融合蛋白MX的方法,其特征在于,該方法包括:(a)將粒細胞巨噬細胞集落刺激因子的編碼序列和白細胞介素3的編碼序列融合在一起,形成編碼融合蛋白MX的多核苷酸序列,所述的多核苷酸序列編碼氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的融合蛋白;(b)將步驟(a)中編碼融合蛋白MX的多核苷酸序列插入到表達載體,形成含有融合蛋白MX編碼序列的表達載體;(c)將步驟(b)中含有融合蛋白MX編碼序列的表達載體轉入巴斯德畢赤酵母細胞;(d)篩選出MX編碼序列整合入基因組的轉化的巴斯德畢赤酵母細胞;(e)在適合編碼MX融合蛋白的條件下,培養(yǎng)步驟(d)中轉化的巴斯德畢赤酵母細胞;(f)分離出MX融合蛋白。
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摘要
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本發(fā)明涉及在酵母中表達分泌性的粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)和白細胞介素3(IL-3)的融合蛋白(簡稱為“MX融合蛋白”)的方法,還涉及生產(chǎn)該融合蛋白的工程菌和所生產(chǎn)的融合蛋白MX。本發(fā)明的MX融合蛋白基因十分穩(wěn)定,可調控表達,且產(chǎn)物為天然氨基酸蛋白序列,無置換突變。
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國際公布
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