公開(公告)號(hào)
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CN1146657C
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公開(公告)日
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2004.04.21
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN01100579.3
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申請(qǐng)日期
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2001.01.16
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專利名稱
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一種重組單純皰疹病毒的構(gòu)建及用途
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主分類號(hào)
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C12N7/01
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分類號(hào)
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C12N7/01;C12N15/33;C12N15/52;C12N9/00;C12N15/63;A61K48/00;//(C12N7/01,C12R1:92)
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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本元正陽(yáng)基因技術(shù)股份有限公司
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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吳小兵;曹暉;侯云德
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地址
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100176 北京市經(jīng)濟(jì)技術(shù)開發(fā)區(qū)永昌中路6號(hào)
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頒證日
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2004.04.21
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國(guó)際申請(qǐng)
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進(jìn)入國(guó)家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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代理人
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國(guó)省代碼
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北京;11
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主權(quán)項(xiàng)
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一種重組HSV病毒,其特征在于,所述的重組HSV病毒的HSV-1基因組中去除了包裝信號(hào)pac,并插入了一個(gè)包含兩個(gè)同向排列的loxP的包裝信號(hào)loxP-pac-loxP;所述的重組HSV病毒的HSV-1基因組中插入了一個(gè)帶有可誘導(dǎo)啟動(dòng)子的重組酶Cre基因。
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摘要
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本發(fā)明提出了一種重組單純皰疹病毒,其天然的包裝信號(hào)(pac)已經(jīng)缺失,取而代之的是一個(gè)經(jīng)過(guò)改造的包裝信號(hào),該包裝信號(hào)兩端各帶一個(gè)重組序列:loxP序列;在本重組病毒基因組中的另一處插入了一個(gè)編碼特異識(shí)別上述重組序列的重組酶Cre的基因,該Cre的基因帶有一個(gè)可調(diào)控的啟動(dòng)子:金屬硫蛋白啟動(dòng)子,以控制Cre的表達(dá)。該重組病毒感染細(xì)胞后,加入適量鋅離子激活金屬硫蛋白啟動(dòng)子,表達(dá)重組酶Cre,Cre介導(dǎo)兩個(gè)loxP序列間發(fā)生重組,將包裝信號(hào)切除,從而病毒基因組雖然能復(fù)制和表達(dá)各種蛋白,但基因組無(wú)法包裝進(jìn)病毒衣殼中,因此不產(chǎn)生子代病毒。如果細(xì)胞中不加鋅離子,Cre不表達(dá),重組病毒基因組上的包裝信號(hào)不被切除,因此該重組病毒能在細(xì)胞中可以正常復(fù)制和傳代。本發(fā)明提出的重組病毒可以用作單純皰疹病毒擴(kuò)增子載體的輔助病毒,以及直接作為基因治療載體用于惡性腫瘤的治療,和用于病毒空殼的制備。
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國(guó)際公布
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