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非抗生素抗性穿梭質(zhì)粒表達(dá)載體及其構(gòu)建方法和應(yīng)用

醫(yī)藥數(shù)據(jù)庫中心 藥學(xué)論壇 王春鳳;孫哲/王春鳳;秦澤榮;孫哲;劉尚高
公開(公告)號 CN1482247A  
公開(公告)日 2004.03.17  
申請(專利)號 CN03100415.6  
申請日期 2003.01.13  
專利名稱 非抗生素抗性穿梭質(zhì)粒表達(dá)載體及其構(gòu)建方法和應(yīng)用  
主分類號 C12N15/64  
分類號 C12N15/64;C12N15/65;C12N15/74;C12N15/70;C12N1/21;A23C9/123;A61K35/74;A23K1/16  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 王春鳳;孫哲  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 王春鳳;秦澤榮;孫哲;劉尚高  
地址 130118吉林省長春市南關(guān)區(qū)南環(huán)路東吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院  
頒證日  
國際申請  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 長春科宇專利代理有限責(zé)任公司  
代理人 李恩慶  
國省代碼 吉林;22  
主權(quán)項(xiàng) 一種非抗生素抗性穿梭質(zhì)粒表達(dá)載體,其特征是先在基本質(zhì)粒載體pMG36e的酶切位點(diǎn)上進(jìn)行酶切,再在近紅霉素Er端連接非抗生素抗性基因,最后除去紅霉素抗性基因Er,用pMG425t表示,表達(dá)式為:pMG36e+ThyA/(β-Gal)-Er=pMG425t式中,pMG36e為基本質(zhì)粒載體,它含有紅霉素抗性基因,可在大腸桿菌和乳酸桿菌中表達(dá),ThyA/(β-Gal)為非抗生素抗性基因,Er表示紅霉素抗性基因,+號表示連接,-號表示去除,=號表示形成,pMG425t表示本發(fā)明的非抗生素抗性穿梭表達(dá)質(zhì)粒載體。  
摘要 本發(fā)明屬于生物工程技術(shù)領(lǐng)域,是一種非抗生素抗性穿梭質(zhì)粒表達(dá)載體及構(gòu)建方法和應(yīng)用。本發(fā)明是把基本質(zhì)粒載體pMG36e,經(jīng)限制性內(nèi)切酶EcoRI在其酶切位點(diǎn)上酶切,成為線型。在近紅霉素Er端連接非抗生素抗性基因,之后環(huán)化回環(huán)狀。再在這個環(huán)上把紅霉素基因Er用內(nèi)切酶去除,形成非抗生素抗性穿梭表達(dá)質(zhì)粒載體。將人或動物疾病的保護(hù)性抗原基因連接入本發(fā)明的非抗生素抗性質(zhì)粒載體,可以制造功能性食品,對特定疾病具有預(yù)防、保護(hù)作用的細(xì)菌懸液、口服補(bǔ)劑、管飼產(chǎn)品以及動物性疫苗。本發(fā)明用非抗生素可行基因替代紅霉素基因,在使用過程中不存在抗生素抗性基因擴(kuò)散的問題。  
國際公布  
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