公開(公告)號(hào)
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CN1128875C
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公開(公告)日
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2003.11.26
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN96196213.5
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申請(qǐng)日期
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1996.08.12
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專利名稱
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制備多肽變異體的方法
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主分類號(hào)
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C12N15/10
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分類號(hào)
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C12N15/10;C12N15/62;C12N15/63
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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1995.8.11 DK 0907/1995;1995.9.20 DK 1047/1995
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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諾沃奇梅茲有限公司
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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J·S·奧凱爾斯
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地址
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丹麥巴格斯瓦德
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頒證日
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國(guó)際申請(qǐng)
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PCT/DK96/00343 1996.8.12
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進(jìn)入國(guó)家日期
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1998.02.11
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專利代理機(jī)構(gòu)
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中國(guó)國(guó)際貿(mào)易促進(jìn)委員會(huì)專利商標(biāo)事務(wù)所
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代理人
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李瑛
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國(guó)省代碼
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丹麥;DK
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主權(quán)項(xiàng)
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用于制備多肽變異體的方法,包括通過(guò)體內(nèi)重組將同源DNA序列的不同的核苷酸序列進(jìn)行改組,包括下列步驟:(a)形成至少一個(gè)含有編碼多肽的DNA序列的環(huán)狀質(zhì)粒,(b)在編碼多肽的DNA序列內(nèi)打開所述的環(huán)狀質(zhì)粒,(c)制備至少一個(gè)包括與至少一種環(huán)狀質(zhì)粒的多肽編碼區(qū)的至少一部分同源的DNA序列的DNA片段,(d)將至少一種所述的開環(huán)質(zhì)粒與至少一種所述同源DNA片段一起導(dǎo)入到重組宿主細(xì)胞,所述同源DNA片段覆蓋了編碼所述多肽的全長(zhǎng)DNA序列或其一部分,(e)培養(yǎng)所述的重組宿主細(xì)胞,和(f)篩選陽(yáng)性多肽變異體。
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摘要
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本發(fā)明涉及通過(guò)體內(nèi)重組將同源DNA序列的不同的核苷酸序列改組制備陽(yáng)性多肽變異體的方法,包括下列步驟:(a)形成至少一種含有編碼多肽的DNA序列的環(huán)狀質(zhì)粒,(b)在編碼多肽的DNA序列內(nèi)打開所述的環(huán)狀質(zhì)粒,(c)制備至少一種包括與至少一種環(huán)狀質(zhì)粒的多肽編碼區(qū)的至少一部分同源的DNA序列的DNA片段,(d)將至少一種所述的開環(huán)質(zhì)粒與至少一種所述同源DNA片段一起導(dǎo)入到重組宿主細(xì)胞,所述同源DNA片段覆蓋了編碼所述多肽的全長(zhǎng)DNA序列或其一部分,(e)培養(yǎng)所述的重組宿主細(xì)胞,和(f)篩選陽(yáng)性多肽變異體。
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國(guó)際公布
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WO97/07205 英 1997.2.27
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