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制備多肽變異體的方法

公開(公告)號(hào) CN1128875C  
公開(公告)日 2003.11.26  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN96196213.5  
申請(qǐng)日期 1996.08.12  
專利名稱 制備多肽變異體的方法  
主分類號(hào) C12N15/10  
分類號(hào) C12N15/10;C12N15/62;C12N15/63  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán) 1995.8.11 DK 0907/1995;1995.9.20 DK 1047/1995  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 諾沃奇梅茲有限公司  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 J·S·奧凱爾斯  
地址 丹麥巴格斯瓦德  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng) PCT/DK96/00343 1996.8.12  
進(jìn)入國(guó)家日期 1998.02.11  
專利代理機(jī)構(gòu) 中國(guó)國(guó)際貿(mào)易促進(jìn)委員會(huì)專利商標(biāo)事務(wù)所  
代理人 李瑛  
國(guó)省代碼 丹麥;DK  
主權(quán)項(xiàng) 用于制備多肽變異體的方法,包括通過(guò)體內(nèi)重組將同源DNA序列的不同的核苷酸序列進(jìn)行改組,包括下列步驟:(a)形成至少一個(gè)含有編碼多肽的DNA序列的環(huán)狀質(zhì)粒,(b)在編碼多肽的DNA序列內(nèi)打開所述的環(huán)狀質(zhì)粒,(c)制備至少一個(gè)包括與至少一種環(huán)狀質(zhì)粒的多肽編碼區(qū)的至少一部分同源的DNA序列的DNA片段,(d)將至少一種所述的開環(huán)質(zhì)粒與至少一種所述同源DNA片段一起導(dǎo)入到重組宿主細(xì)胞,所述同源DNA片段覆蓋了編碼所述多肽的全長(zhǎng)DNA序列或其一部分,(e)培養(yǎng)所述的重組宿主細(xì)胞,和(f)篩選陽(yáng)性多肽變異體。  
摘要 本發(fā)明涉及通過(guò)體內(nèi)重組將同源DNA序列的不同的核苷酸序列改組制備陽(yáng)性多肽變異體的方法,包括下列步驟:(a)形成至少一種含有編碼多肽的DNA序列的環(huán)狀質(zhì)粒,(b)在編碼多肽的DNA序列內(nèi)打開所述的環(huán)狀質(zhì)粒,(c)制備至少一種包括與至少一種環(huán)狀質(zhì)粒的多肽編碼區(qū)的至少一部分同源的DNA序列的DNA片段,(d)將至少一種所述的開環(huán)質(zhì)粒與至少一種所述同源DNA片段一起導(dǎo)入到重組宿主細(xì)胞,所述同源DNA片段覆蓋了編碼所述多肽的全長(zhǎng)DNA序列或其一部分,(e)培養(yǎng)所述的重組宿主細(xì)胞,和(f)篩選陽(yáng)性多肽變異體。  
國(guó)際公布 WO97/07205 英 1997.2.27  
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