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一種利用中國(guó)紅豆杉細(xì)胞生產(chǎn)紫杉烷類的方法

公開(公告)號(hào) CN1118578C  
公開(公告)日 2003.08.20  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN00125305.0  
申請(qǐng)日期 2000.09.21  
專利名稱 一種利用中國(guó)紅豆杉細(xì)胞生產(chǎn)紫杉烷類的方法  
主分類號(hào) C12P17/02  
分類號(hào) C12P17/02;C12P7/62  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 華東理工大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 鐘建江;董浩迪  
地址 200237上海市梅隴路130號(hào)  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 上海順華專利代理有限責(zé)任公司  
代理人 李鴻儒  
國(guó)省代碼 上海;31  
主權(quán)項(xiàng) 一種利用中國(guó)紅豆杉細(xì)胞生產(chǎn)云南紫杉烷的方法,包括從植株幼莖外植體誘導(dǎo)的愈傷組織中分離獲得中國(guó)紅豆杉細(xì)胞,其特征在于還包括如下步驟:(1)將中國(guó)紅豆杉細(xì)胞移入液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)基采用Murashige-Skoog培養(yǎng)基,另添加0.1-1.0mg/L6-芐基腺嘌呤,0.05-0.5mg/L2,4-二氯苯乙酸,0.05-0.5mg/L萘乙酸,20-500mg/L抗壞血酸及10-50mg/L蔗糖,每隔14天傳代一次,培養(yǎng)使用旋轉(zhuǎn)式搖床,轉(zhuǎn)速為60-200rpm,培養(yǎng)溫度20-30℃,暗培養(yǎng),接種量為20-200g/L濕重;(2)然后將所獲得的中國(guó)紅豆杉濕細(xì)胞置于含培養(yǎng)基的搖瓶中暗培養(yǎng),培養(yǎng)周期為12-25天,從所獲得的培養(yǎng)物中采用常規(guī)的方法收集云南紫杉烷;在搖瓶培養(yǎng)前期細(xì)胞快速生長(zhǎng)階段,添加誘導(dǎo)劑二氫甲基茉莉酮酸酯或甲基茉莉酮酸酯至培養(yǎng)基中誘導(dǎo)劑的最終濃度為1-1000μM。  
摘要 本發(fā)明提供了一種利用中國(guó)紅豆杉細(xì)胞生產(chǎn)紫杉烷類的方法。本發(fā)明利用中國(guó)紅豆杉細(xì)胞(Taxus chinensis)的懸浮培養(yǎng),通過誘導(dǎo)劑的誘導(dǎo)與補(bǔ)糖添加的組合,十分顯著地提高了云南紫杉烷(Tc)的生產(chǎn)效率,獲得的Tc產(chǎn)量大大超過目前文獻(xiàn)報(bào)道的最高值,Tc生產(chǎn)率最高可達(dá)30.2mg/(L.d),最高產(chǎn)量可達(dá)538.9mg/L,是一種很有工業(yè)應(yīng)用前景的Tc的生產(chǎn)方法。  
國(guó)際公布  
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