公開(公告)號
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CN100363497C
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公開(公告)日
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2008.01.23
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申請(專利)號
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CN200510065889.2
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申請日期
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2005.04.21
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專利名稱
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基因重組技術(shù)制備PGRP31-98片段的方法
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主分類號
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C12N15/63(2006.01)I
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分類號
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C12N15/63(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12N15/13(2006.01)I;C07K16/30(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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中國輻射防護研究院
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發(fā)明(設(shè)計)人
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周小林
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地址
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030006山西省太原市學(xué)府街270號
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頒證日
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國際申請
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進入國家日期
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專利代理機構(gòu)
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核工業(yè)專利中心
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代理人
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任曉航
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國省代碼
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山西;14
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主權(quán)項
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一種基因重組技術(shù)制備PGRP(31-98)片段的方法,其特征在于:該方法用pRSETc載體與PGRP(31-98)基因片段進行連接,采用NheI和HindIII雙酶切位點定向克隆,以保證正確的插入連接方向;將連接有目的基因的pRSETc載體轉(zhuǎn)化到廣泛用于靶基因表達的大腸桿菌BL21DE3進行重組表達;將表達的PGRP(31-98)產(chǎn)物進行分離、純化。
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摘要
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本發(fā)明涉及一種肺癌抗原的人工制備技術(shù),具體為基因重組技術(shù)制備PGRP(31-98)片段的方法。該方法用pRSETc載體與PGRP(31-98)基因片段進行連接,采用NheI和HindIII雙酶切位點定向克隆,以保證正確的插入連接方向;將連接有目的基因的pRSETc載體轉(zhuǎn)化到廣泛用于靶基因表達的大腸桿菌BL21DE3進行重組表達;將表達的PGRP(31-98)產(chǎn)物進行分離、純化。保證了PGRP(31-98)表達產(chǎn)物的正確、特異、穩(wěn)定和高效,相對現(xiàn)有技術(shù)大大縮短了制備的時間;克服了現(xiàn)有技術(shù)中用溴化氰切除表達產(chǎn)物上的TrpE蛋白帶來的缺點,有利于大量人工制備工藝的建立和產(chǎn)品的穩(wěn)定。
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國際公布
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