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基因重組技術(shù)制備PGRP31-98片段的方法

醫(yī)藥數(shù)據(jù)庫中心 藥學(xué)論壇 中國輻射防護研究院/周小林
公開(公告)號 CN100363497C  
公開(公告)日 2008.01.23  
申請(專利)號 CN200510065889.2  
申請日期 2005.04.21  
專利名稱 基因重組技術(shù)制備PGRP31-98片段的方法  
主分類號 C12N15/63(2006.01)I  
分類號 C12N15/63(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12N15/13(2006.01)I;C07K16/30(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 中國輻射防護研究院  
發(fā)明(設(shè)計)人 周小林  
地址 030006山西省太原市學(xué)府街270號  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構(gòu) 核工業(yè)專利中心  
代理人 任曉航  
國省代碼 山西;14  
主權(quán)項 一種基因重組技術(shù)制備PGRP(31-98)片段的方法,其特征在于:該方法用pRSETc載體與PGRP(31-98)基因片段進行連接,采用NheI和HindIII雙酶切位點定向克隆,以保證正確的插入連接方向;將連接有目的基因的pRSETc載體轉(zhuǎn)化到廣泛用于靶基因表達的大腸桿菌BL21DE3進行重組表達;將表達的PGRP(31-98)產(chǎn)物進行分離、純化。  
摘要 本發(fā)明涉及一種肺癌抗原的人工制備技術(shù),具體為基因重組技術(shù)制備PGRP(31-98)片段的方法。該方法用pRSETc載體與PGRP(31-98)基因片段進行連接,采用NheI和HindIII雙酶切位點定向克隆,以保證正確的插入連接方向;將連接有目的基因的pRSETc載體轉(zhuǎn)化到廣泛用于靶基因表達的大腸桿菌BL21DE3進行重組表達;將表達的PGRP(31-98)產(chǎn)物進行分離、純化。保證了PGRP(31-98)表達產(chǎn)物的正確、特異、穩(wěn)定和高效,相對現(xiàn)有技術(shù)大大縮短了制備的時間;克服了現(xiàn)有技術(shù)中用溴化氰切除表達產(chǎn)物上的TrpE蛋白帶來的缺點,有利于大量人工制備工藝的建立和產(chǎn)品的穩(wěn)定。  
國際公布  
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