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一種制備別藻藍(lán)蛋白類熒光蛋白質(zhì)的方法

公開(kāi)(公告)號(hào) CN101144077A  
公開(kāi)(公告)日 2008.03.19  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN200710029673.X  
申請(qǐng)日期 2007.08.09  
專利名稱 一種制備別藻藍(lán)蛋白類熒光蛋白質(zhì)的方法  
主分類號(hào) C12N15/09(2006.01)I  
分類號(hào) C12N15/09(2006.01)I;C07K14/405(2006.01)I  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 廣州天寶頌原生物科技開(kāi)發(fā)有限公司  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 夏 坤;佟順剛  
地址 510663廣東省廣州市科學(xué)城攬?jiān)侣?0號(hào)廣州科技創(chuàng)新基地D區(qū)416房  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 廣州市南鋒專利事務(wù)所有限公司  
代理人 劉 媖  
國(guó)省代碼 廣東;44  
主權(quán)項(xiàng) 一種制備別藻藍(lán)蛋白類熒光蛋白質(zhì)的方法,其特征在于它包括以下步驟: (1)將beta裂合酶基因或其同源基因克隆于表達(dá)載體中,得到beta裂合酶表達(dá)質(zhì)粒;將別藻藍(lán)蛋白類脫輔基蛋白基因或其同源基因克隆于第二個(gè)表達(dá)載體中,得到脫輔基蛋白表達(dá)質(zhì)粒;將藻藍(lán)膽素生物合成酶基因(ho1和pcyA)或其同源基因克隆于第三個(gè)表達(dá)載體中,得到藻藍(lán)膽素合成質(zhì)粒; (2)將beta裂合酶表達(dá)質(zhì);蛎撦o基蛋白表達(dá)質(zhì);蛟逅{(lán)膽素生物合成酶質(zhì)粒依次轉(zhuǎn)入配套的宿主菌;當(dāng)這些表達(dá)質(zhì)粒都轉(zhuǎn)入宿主菌后,得到相應(yīng)的工程菌,應(yīng)用此工程菌通過(guò)發(fā)酵工程能生產(chǎn)別藻藍(lán)蛋白類熒光蛋白質(zhì);發(fā)酵后,按常規(guī)蛋白質(zhì)提純技術(shù),提純得到相應(yīng)的別藻藍(lán)蛋白類熒光蛋白質(zhì)。  
摘要 本發(fā)明公開(kāi)了一種制備別藻藍(lán)蛋白類熒光蛋白質(zhì)的方法,通過(guò)應(yīng)用藻膽蛋白beta裂合酶催化藻藍(lán)膽素與別藻藍(lán)蛋白類脫輔基蛋白共價(jià)結(jié)合,制備別藻藍(lán)蛋白類熒光蛋白質(zhì);本發(fā)明的方法應(yīng)用生物過(guò)程生產(chǎn)別藻藍(lán)蛋白類熒光蛋白質(zhì),是一種環(huán)境友好的生產(chǎn)方法;別藻藍(lán)蛋白類熒光蛋白質(zhì)能應(yīng)用于食品、保健與醫(yī)藥功能材料領(lǐng)域,特別是應(yīng)用為生物和醫(yī)學(xué)分子檢測(cè)領(lǐng)域的熒光探針。  
國(guó)際公布  
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