蛋種雞場雞白痢檢測方法與凈化程序
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雞白痢是由雞白痢沙門氏菌（Salmonella pullorum, SP)引起的細菌性疾病，本病既可水平傳播，又可通過種蛋垂直傳染，是危害養(yǎng)雞業(yè)最嚴重的疾病之一，本文就大型蛋種雞場對此病實施的檢測方法和凈化措施進行了綜述。1 雞白痢檢測方法 在規(guī)模化蛋種雞場中最常選用的是平板凝集試驗來進行大規(guī)模雞群的檢測，以實施凈化。1.1 全血平板凝集試驗 操作方法為用微量移液器吸取30μL雞白痢抗原，滴在潔凈的普通玻璃板或陶瓷板上，用注射器針頭刺破被檢雞只翅膀內(nèi)側(cè)的靜脈血管，每只雞更換1個針頭，用微量移液器吸取30μL流出的血液，與抗原充分混合，隨即涂展成直徑為1.5～2cm的圓形混合液，搖晃玻板，并隨時觀察凝集反應(yīng)。1.2 血清平板凝集試驗 首先采集待檢雞只全血樣本，將血樣置于塑料離心管內(nèi)，并記錄對應(yīng)雞只編號，待血清自然析出后，吸取血清，進行血清平板凝集試驗。1.3 結(jié)果判斷 檢測前，需進行抗原對照試驗，取30μL抗原，與等體積標準強陽性血清、弱陽性血清、陰性血清按等體積混合，在2～3分鐘內(nèi)，強陽性血清出現(xiàn)100%凝集（++++)；弱陽性血清出現(xiàn)50%（++)；陰性血清不凝集（-)，方可進行檢測。 抗原與待檢樣品混合后2～3分鐘，判定結(jié)果，有50%（++)以上凝集為陽性，不發(fā)生凝集為陰性。1.4 注意事項 全血平板凝集試驗，操作簡便、反應(yīng)速度快，可在現(xiàn)場進行，在生產(chǎn)實踐中應(yīng)用最為廣泛。但由于受雞舍內(nèi)環(huán)境、光線、溫度等條件影響，致使檢測結(jié)果存在一定假陽性的比例。此外，該方法靈敏度有一定的局限性，只能檢測到抗體滴度較高的帶菌雞，因此常存在漏檢現(xiàn)象。而血清中抗體含量較高，因此血清平板凝集較全血平板凝集特異性強、敏感性高、檢出陽性率高。但操作相對復(fù)雜，且需要對待檢雞只進行編號，因此，該方法適用于核心雞群凈化檢疫。 檢測用抗原應(yīng)置于2-8℃冷暗處保存，回復(fù)到室溫后方可檢測，使用過程中要保持抗原處于懸浮液狀態(tài)，檢測需在20～30℃的環(huán)境中進行。抗原與待檢血清或全血需等體積混合，反應(yīng)時間控制在2～3分鐘內(nèi)，不得任意延長或縮短。待檢血清或全血不應(yīng)有細菌污染。玻板必須光滑、洗凈，否則影響實驗結(jié)果。2 凈化程序 通過檢測淘汰陽性雞只是凈化工作的核心，因此，科學(xué)、嚴格的檢測程序是實現(xiàn)凈化的重要保障。根據(jù)白痢桿菌陽性
雞血清抗體消長規(guī)律，種雞的首次最適檢疫時間為120～140日齡，即開產(chǎn)前。此時種雞處于性成熟階段，血檢時反應(yīng)速度快，檢出率高，并且在生產(chǎn)種蛋前進行檢測，對確保種蛋無白痢桿菌感染十分重要。然而，根據(jù)雞白痢的血清學(xué)特點，僅靠1次檢疫是遠遠達不到凈化效果的，必須通過兩次，甚至多次檢測將處于不同感染時期的帶菌雞徹底檢出并淘汰。2.1 曾祖代雞群凈化程序 在產(chǎn)蛋率達10%、繼代前2次檢疫。采用血清平板凝集的方法，在雞群產(chǎn)蛋率達10%時首次普檢。如果有陽性雞檢出，則在1個月后進行第二次普檢，直至無陽性雞檢出；如果無陽性雞檢出，則以后每月公雞普測，母雞每季度抽測一次，每次抽測5～10%，超標時普檢。繼代前進行第二次普檢。每次檢出的陽性雞必須立即淘汰，并對環(huán)境、籠具等徹底消毒。2.2 祖代雞群凈化程序 雞群產(chǎn)蛋率達10%時普檢。如果雞群陽性率超標（1‰)，每月普檢一次，直至達標后停止普檢；如果首次檢測時陽性率不超標，以后每月公雞普測，母雞每季度抽測1次，每次抽測5～10%，超標時普檢。每次檢出的陽性雞必須立即淘汰，并對環(huán)境、籠具等徹底消毒。2.3 父母代雞群凈化程序 雞群產(chǎn)蛋率達10%時普檢。如果雞群陽性率超標（2‰)，35周齡第二次普檢。如果首次檢測時陽性率低于以上標準，以后每月公雞普測，母雞每季度抽測1次，每次抽測5～10%，超標時普檢。每次檢出的陽性雞必須立即淘汰，并對環(huán)境、籠具等徹底消毒。
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