口蹄疫、豬水皰病反向間接血凝試驗(yàn)致敏紅細(xì)胞診斷液

口蹄疫、豬水皰病反向間接血凝試驗(yàn)致敏紅細(xì)胞診斷液

    本品系用口蹄疫病毒A、O、C、Asia I型毒種和豬水皰病病毒毒種分別高度免疫豚鼠或豬，分離血清，提取免疫球蛋白，致敏紅細(xì)胞制成。用于口蹄疫和水皰病的鑒別診斷。

【性狀】靜置后，致敏紅細(xì)胞沉于瓶底，上層為淡黃色透明液體。振搖后，致敏紅細(xì)胞均勻分散于溶液中。

【作用與用途】用于鑒別診斷VI蹄疫和水皰病的反向間接血凝試驗(yàn)。

【用法與判定】 (1)使用標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清對(duì)O型口蹄疫和豬水皰病進(jìn)行鑒別診斷時(shí)，按以下方法。a.在96孔血凝滴定板上，每份被檢樣品做4排孔，每孔先各加25tzL稀釋液。b.每排第1孔各加被檢樣品25tuL，然后分別由左至右進(jìn)行2倍系列稀釋至第7孔(豎板)或第11孔(橫板)。每排最后孔留作空白對(duì)照。c.加標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清在第1排和第3排，每孔加稀釋液25p-L。在第2排，每孔加入1：20稀釋的O型口蹄疫標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清25I生L。在第4排，每孔加入1：100稀釋的豬水皰病標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清259L。 放微型混合器上振蕩1-2min，加蓋，置37℃作用30min。d.加致敏紅細(xì)胞診斷液在第1排和第2排，每孔加入1％O型口蹄疫抗體致敏紅細(xì)胞懸液25p.L。 在第3排和第4排孔，每孔加入1％豬水皰病抗體致敏紅細(xì)胞懸液25uL。將血凝滴定板置微型混合器上振蕩1-2min，加蓋，放室溫2h后觀察結(jié)果。e.結(jié)果判定若第1排出現(xiàn)2孔以上的凝集(50％以上凝集)，且第2排相對(duì)應(yīng)孔出現(xiàn)2個(gè)孔以上的凝集抑制；第3、4排不出現(xiàn)凝集，判為口蹄疫O型陽(yáng)性。若第3排出現(xiàn)2個(gè)孔以上的凝集(50％以上凝集)，并且第4排對(duì)應(yīng)孔出現(xiàn)2個(gè)孔以上的凝集抑制，第1、2排不出現(xiàn)凝集，則判為豬水皰病陽(yáng)性。以能引起50％紅細(xì)胞凝集的被檢樣品最大稀釋度為被檢樣品的血凝效價(jià)。

(2)使用標(biāo)準(zhǔn)抗原對(duì)口蹄疫各型和豬水皰病進(jìn)行鑒別診斷時(shí)，按下列方法操作。a.被檢樣品的稀釋取試管8支，自第1管開(kāi)始由左至右用稀釋液進(jìn)行2倍系列稀釋(即1：6、1：12、1：24……1：768)，每管0.5mL。b.滴加被檢樣品  在血凝滴定板上的第1至第5排，每排的第8孔滴加第8管稀釋被檢樣品2滴，每排的第7孔滴加第7管稀釋被檢樣品2滴，以此類(lèi)推至第1孔。每排的第9孔滴加稀釋液2滴，作為稀釋液對(duì)照，每排的第10孔按順序分別滴加A、O、C、Asia工型口蹄疫和豬水皰病標(biāo)準(zhǔn)抗原(1：30稀釋)各2滴，作為陽(yáng)性對(duì)照(注意每型換滴管1支)。C.滴加致敏紅細(xì)胞診斷液先將紅細(xì)胞診斷液搖勻，于滴定板第1至第5排孔分別滴加A、0、C、Asia I口蹄疫及豬水皰病致敏紅細(xì)胞診斷液，每孔1滴，置振蕩器上振蕩1-2分鐘，放置20-25℃，1.5-2小時(shí)后判定結(jié)果。如果被檢樣品來(lái)自牛、羊等偶蹄獸，僅用口蹄疫4個(gè)型的致敏紅細(xì)胞診斷液；如果被檢材料來(lái)自豬，除用上述4種診斷液外，還用豬水皰病紅細(xì)胞診斷液。d.結(jié)果判定  (a)觀察血凝板上各排孔的凝集圖形，如果只有第1排孔凝集，且稀釋液對(duì)照孔不凝集，陽(yáng)性對(duì)照孔凝集，則證明此種凝集是與A型紅細(xì)胞診斷液同型病毒所致的特異性凝集，被檢樣品即判為A型。若只有第2排孔凝集，其余4排孔不凝集，則待檢抗原為O型，以此類(lèi)推。(b)致敏紅細(xì)胞50％凝集的醫(yī)學(xué)全在線被檢樣品最高稀釋度為其凝集效價(jià)。(c)出現(xiàn)2排孔以上的凝集時(shí)，如某排孔的凝集效價(jià)高于其余各排孔的凝集效價(jià)至少4倍，即可判為陽(yáng)性，其余判為陰性。

【注意事項(xiàng)】保存與使用中，勿凍結(jié)，勿倒置。

【貯藏】在2-8℃，有效期為6個(gè)月。

附注：凝集反映強(qiáng)度標(biāo)準(zhǔn)

 ++++ 100％凝集。紅細(xì)胞均勻地分布于孔底周?chē)��?/p>

 +++  75％凝集。紅細(xì)胞均勻地分布于孔底周?chē)�，但孔底中心有紅細(xì)胞形成的針尖大的小點(diǎn)。

 ++ 50％凝集。孔底周?chē)�有不均勻的紅細(xì)胞分布，孔底有一紅細(xì)胞沉下的小點(diǎn)。

 + 25％凝集。孔底周?chē)�有不均勻的紅細(xì)胞分布，但大部分紅細(xì)胞已沉積于孔底。

 一  不凝集。紅細(xì)胞完全沉積于孔底成一圓點(diǎn)。