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滅菌方法;常用滅菌參數(shù);無菌操作法
滅菌系指采用適當?shù)奈锢砘蚧瘜W方法殺滅或除去物體上或物品中活的微生物（包括繁殖體和芽孢）的過程。微生物包括細菌、真菌、病毒等，微生物的種類不同、滅菌方法不同，滅菌效果也不同。細菌的芽孢具有較強的抗熱能力，因此滅菌效果常以殺滅芽孢為標準。滅菌是藥劑制備中一項重要的操作，對于注射劑、眼用制劑及應用于創(chuàng)面的制劑等無菌制劑是不可缺少的環(huán)節(jié)。藥劑學中采用的滅菌措施必須達到既要除去或殺滅微生物，又要保證藥物的穩(wěn)定性、治療作用及安全性的基本要求。
一、 滅菌方法
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1．干熱滅菌法
干熱滅菌法是利用火焰或干熱空氣進行滅菌的方法，其原理是利用高溫破壞菌體蛋白質(zhì)與核酸中的氫鍵，使蛋白質(zhì)變性或凝固、核酸破壞、酶失去活性，微生物死亡。
�。�1）火焰滅菌法。是將待滅菌物品直接置于火焰中燒灼進行滅菌的方法，滅菌迅速、可靠、簡便，適用于耐火焰材質(zhì)的物品如金屬、玻璃用具或容器及瓷器等的滅菌，不能用于藥品的滅菌。
（2）干熱空氣滅菌法。是將待滅菌物品置于高溫干熱空氣中滅菌的方法，需要長時間高熱環(huán)境才能達到滅菌效果。適用于耐高溫材質(zhì)的物品（玻璃、金屬制品等）及耐高溫、不允許濕氣穿透的油脂類和粉末化學藥品。干熱空氣滅菌條件一般為：135～145℃滅菌3～5h；160～170℃滅菌2～4h；180～200℃滅菌0.5～1h。欲破壞熱原則需180℃3～4h、200℃60min或250℃30～45min。
2．濕熱滅菌法
濕熱滅菌法是將待滅菌物品置于飽和蒸氣或流通蒸氣或沸水中進行滅菌的方法。飽和蒸氣潛熱大，穿透力強，容易使蛋白質(zhì)變性或凝固、酶失活，滅菌效率較干熱空氣滅菌法高。
�。�1）熱壓滅菌法。是指用壓力高于常壓的飽和水蒸氣加熱殺滅微生物的方法。該法滅菌可靠，能殺滅所有細菌繁殖體和芽孢，廣泛用于藥物制劑的生產(chǎn)。凡耐高溫、耐高壓蒸氣的藥物制劑、金屬或玻璃容器及用具、瓷器、橡膠塞、膜濾器等均能采用此法。熱壓滅菌條件（溫度、蒸氣表壓與時間）為：115℃（67kPa），30min；121℃（97kPa），20min；126℃（139 kPa），15min。
3．射線滅菌法
（1）輻射滅菌法。以放射性同位素（60Co或137Cs）放射的γ射線殺菌的方法。原理是射線可直接破壞細菌DNA，導致微生物死亡。輻射滅菌的特點是不升高滅菌產(chǎn)品的溫度，穿透性強，適合于維生素、抗生素、激素、肝素、羊腸線、醫(yī)療器械、高分子材料等的滅菌。
（2）紫外線滅菌法。指用波長200～300nm的紫外線照射殺滅微生物的方法，滅菌力最強的波長是254nm。是利用紫外線作用于菌體核酸蛋白促使其變性，同時空氣受紫外線照射后產(chǎn)生微量臭氧，共同起殺菌作用。本法適用于表面滅菌、無菌室的空氣滅菌。缺點是穿透力差，不能用于安瓿中藥液滅菌。操作者應注意勞動保護，皮膚和眼睛不能暴露于紫外線下，否則照射過久會引起結(jié)膜炎、紅斑和角膜灼傷等疾病。
�。�3）微波滅菌法。采用頻率300MHz～300kMHz的電磁波照射產(chǎn)生熱能殺滅微生物的方法。是利用極性分子強烈吸收微波能量后劇烈旋轉(zhuǎn)、摩擦生熱，達到滅菌效果。適用于水性注射液滅菌。
4．濾過除菌法
濾過除菌法是指用濾過方法除去活的或死的微生物的方法，是一種機械除菌方法。這種機械稱為除菌濾過器，主要適用于對熱不穩(wěn)定的藥物溶液、氣體、水等的除菌。供除菌用的濾器，要求能有效地從溶液中除凈微生物，溶液能順暢地通過，容易清洗，操作簡便。常用除菌濾器有0.22µm或0.3µm的微孔濾膜或G6垂熔玻璃濾器。此法應配合無菌操作法進行。
�。ǘ┗瘜W滅菌法
化學滅菌法是指用化學藥品直接作用于微生物而將其殺滅的方法。化學殺菌劑不能殺死芽孢，僅對繁殖體有效�；瘜W殺菌的目的在于減少微生物的數(shù)目，以控制無菌狀況至一定水平。
1．氣體滅菌法
氣體滅菌法是指用化學藥品的氣體或蒸氣殺滅微生物的方法。常用氣態(tài)殺菌劑為環(huán)氧乙烷、甲醛、丙二醇、臭氧、乳酸、過氧乙酸等。該法適用于環(huán)境消毒和不耐熱的醫(yī)藥用器具、設(shè)施、設(shè)備及不與殺菌劑發(fā)生反應的固體藥物。 醫(yī)學全在線www.med126.com
2．藥液滅菌法
藥液滅菌法利用藥液殺滅微生物的方法。常用的有0.1%～0.2%苯扎溴銨溶液，75%乙醇、2%煤酚皂溶液、1%聚維酮碘溶液等。
二、常用滅菌參數(shù)
在檢品中存在微量的微生物時，往往難以用現(xiàn)行的無菌檢查法檢出。因此，有必要對滅菌方法的可靠性進行驗證。F與F0值可作為驗證滅菌可靠性的參數(shù)。
（一）D值與Z值
D值是指在一定溫度下，殺滅90%微生物（或殘存率為10%）所需的滅菌時間。在一定滅菌條件下，不同微生物具有不同的D值；同一微生物在不同滅菌條件下，D值亦不相同。因此D值隨微生物的種類、環(huán)境和滅菌溫度變化而異。
Z值是指滅菌時間減少到原來的1/10所需升高的溫度或在相同滅菌時間內(nèi)，殺滅99%的微生物所需提高的溫度。
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