衛(wèi)生毒理學(xué)電子教材-第七章 外來化合物致癌作用及其評(píng)價(jià):第四節(jié) 化學(xué)致癌物危險(xiǎn)評(píng)價(jià)

化學(xué)致癌物危險(xiǎn)評(píng)價(jià)包括兩方面：一是定性的，即該化學(xué)物能否致癌；二是定量的，即進(jìn)行劑量反應(yīng)關(guān)系分析，以推算可接受的危險(xiǎn)度的劑量，或人體實(shí)際可能接觸劑量下的危險(xiǎn)度。

此篩檢又稱為短期致癌物篩檢試驗(yàn)。首先應(yīng)明確，致突變?cè)囼?yàn)是依據(jù)大多數(shù)致癌物具有致突變性而大多數(shù)非致癌物無致突變性來對(duì)受試物進(jìn)行致突變檢測(cè)。篩檢陽性的受試物可能是具有遺傳毒性的致癌物，也可能是具有遺傳毒性的非致癌物；陰性的受試物可能是非遺傳毒性的非致癌物，還有可能是非遺傳毒性的致癌物。

（一)試驗(yàn)組合

根據(jù)目前對(duì)致癌機(jī)理的認(rèn)識(shí)，遺傳毒性致癌物可能有多種致癌機(jī)理，因此要求試驗(yàn)組合盡可能反映較多的遺傳學(xué)終點(diǎn)。

致突變?cè)囼?yàn)觀察到的現(xiàn)象所反映的事件稱為遺傳學(xué)終點(diǎn)。國(guó)際環(huán)境致突變物致癌物防護(hù)委員會(huì)（ICPEMC)1983年提出把致突變?cè)囼?yàn)所反映的遺傳學(xué)終點(diǎn)分為5類：

1．DNA完整性的改變（形成加合物、斷裂、交聯(lián))；

2．DNA重排或交換；

3．DNA堿基序列改變；

4．染色體完整性改變；

5．染色體分離改變。

其中第3實(shí)際指基因突變，而第4和第5依次指染色體結(jié)構(gòu)改變和數(shù)目改變。

試驗(yàn)組合應(yīng)反映3種或5種終點(diǎn)。有一種試驗(yàn)陽性，即可認(rèn)為該受試物為致突變物，因而就可能是遺傳毒性致癌物。組合中出現(xiàn)陽性越多，受試物致癌可能性就m.zxtf.net.cn越大。

一般在試驗(yàn)組合中，每一遺傳學(xué)終點(diǎn)只選一個(gè)試驗(yàn)即可。在終點(diǎn)相同的各種試驗(yàn)中應(yīng)優(yōu)先選擇體內(nèi)試驗(yàn)。

我國(guó)食品安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)程序中的致突變?cè)囼?yàn)組合有體外試驗(yàn)和整體試驗(yàn)。體外試驗(yàn)中Ames試驗(yàn)為必做項(xiàng)目。在整體試驗(yàn)中，可在微核試驗(yàn)和骨髓細(xì)胞染色體畸變中任選一項(xiàng)；在顯性致死試驗(yàn)和睪丸生殖細(xì)胞染色體畸變分析中任選一項(xiàng)。

（二)篩檢試驗(yàn)的可靠性

哺乳動(dòng)物長(zhǎng)期致癌試驗(yàn)又稱哺乳動(dòng)物終生試驗(yàn)，是目前公認(rèn)的確證動(dòng)物致癌物的經(jīng)典方法，較為可靠�；瘜W(xué)致癌的一個(gè)最大特點(diǎn)是潛伏期長(zhǎng)，在嚙齒動(dòng)物進(jìn)行1至2年的試驗(yàn)即相當(dāng)于人類大半生時(shí)間。如果用流行病學(xué)調(diào)查方法確證一種新化學(xué)物的致癌性，一般需要人類接觸受試物20年后才能進(jìn)行。

（一)動(dòng)物選擇

在致癌試驗(yàn)中選擇動(dòng)物最重要的依據(jù)是對(duì)誘發(fā)腫瘤的易感性。因此，要考慮物種、品系、年齡和性別。

物種的選擇對(duì)受試物有特定的靶器官時(shí)尤為重要。如大鼠對(duì)誘發(fā)肝癌敏感，小鼠對(duì)誘發(fā)肺腫瘤敏感。

品系也不同。如同是小鼠， A系及亞系誘發(fā)肺腫瘤敏感。

還應(yīng)考慮自發(fā)腫瘤，應(yīng)選自發(fā)率較低者。

年齡多使用斷乳或斷乳不久的動(dòng)物，性別一般是雌雄各半。

（二)動(dòng)物數(shù)量

為避免假陰性，每組動(dòng)物數(shù)較一般毒性試驗(yàn)為多。如當(dāng)對(duì)照腫瘤自發(fā)率為1%，而染毒組腫瘤發(fā)生率為20%時(shí)，每組動(dòng)物需要40只才能有90%的把握度為陽性；如自發(fā)率上升為10%，或腫瘤發(fā)生率下降為10%，則每組動(dòng)物需214只或114只。所以一般提出每組最少50只動(dòng)物是指當(dāng)對(duì)照組腫瘤自發(fā)率為1、5、10、20或30%時(shí)，染毒組腫瘤發(fā)生率應(yīng)相應(yīng)為20、30、40、50或60%才有0.9以上的把握度獲得陽性結(jié)果。

（三)劑量設(shè)計(jì)

  一般使用三個(gè)劑量。較低劑量為前一級(jí)較高劑量的1/3至1/4，最低劑量最好相當(dāng)于或低于人類實(shí)際可能接觸的劑量。最高劑量應(yīng)為最大耐受量。理想的最大耐受量不應(yīng)致死，也不引起可能縮短壽命的毒性表現(xiàn)和病理改變，與對(duì)照組相比體重下降不大于10%。

（四)試驗(yàn)期限與染毒時(shí)間

  原則上試驗(yàn)期限要求長(zhǎng)期或終生。一般情況下小鼠最少1.5年，大鼠2年；可能時(shí)分別延長(zhǎng)至2年和2.5年。

  一般主張一直染毒至試驗(yàn)結(jié)束。但也有人認(rèn)為，為減少中途非腫瘤死亡，應(yīng)在9至12月后即停止染毒，以便使動(dòng)物可由中毒或亞中毒狀態(tài)恢復(fù)，存活時(shí)間較長(zhǎng)和存活動(dòng)物也較多。對(duì)于完全致癌物無較多影響，對(duì)于促癌劑有可能出現(xiàn)可逆過程，以至腫瘤發(fā)生率下降。

（五)結(jié)果的觀察、分析和評(píng)定

  主要分析指標(biāo)有：

1．腫瘤發(fā)生率

2．多發(fā)性  多發(fā)性是指一個(gè)動(dòng)物出現(xiàn)多個(gè)腫瘤或一個(gè)器官出現(xiàn)多個(gè)腫瘤。

3．潛伏期

致癌物劑量越大潛伏期越短�？梢杂酶鹘M第一個(gè)腫瘤出現(xiàn)的時(shí)間作為該組的潛伏期。這種辦法只適用于能在體表觀察的腫瘤。對(duì)內(nèi)臟的腫瘤，則需分批剖殺，計(jì)算平均潛伏期。

是指在有限的短時(shí)間內(nèi)完成而不是終生，又指觀察的靶器官限定為一個(gè)而不是全部器官和組織。

1．小鼠肺腫瘤誘發(fā)試驗(yàn)

一次或多次給予受試物后，或一次給予受試物一至兩周后持續(xù)多次給予促癌劑，16至30周左右結(jié)束試驗(yàn)，如受試物具有誘發(fā)腫瘤作用，可在肺組織發(fā)現(xiàn)腫瘤。

2．大鼠肝轉(zhuǎn)變?cè)钫T發(fā)試驗(yàn)

肝癌發(fā)生過程有幾種明顯的肝細(xì)胞病灶。較早發(fā)現(xiàn)的是轉(zhuǎn)變?cè)睿�進(jìn)一步發(fā)展成為瘤性結(jié)節(jié)。用酶組織化學(xué)和免疫組織化學(xué)方法將轉(zhuǎn)變?cè)詈徒Y(jié)節(jié)中的谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶和胚胎型谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶染色，顯色表明有肝癌細(xì)胞生化表型的癌前細(xì)胞。

3．小鼠皮膚腫瘤誘發(fā)試驗(yàn) 

小鼠皮膚表面涂抹某些致癌物能誘發(fā)乳頭狀瘤或癌，皮下注射可誘發(fā)肉瘤。一般9個(gè)月左右結(jié)束試驗(yàn)，如在啟動(dòng)后加用佛波醇酯，則縮短至20周左右。

4．雌性SD大鼠乳腺癌誘發(fā)試驗(yàn)

多環(huán)烴芳香胺、氯烷、亞硝基脲等能在9個(gè)月以內(nèi)誘發(fā)乳腺癌。

人類致癌物的確定主要根據(jù)：

1．流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果能夠重復(fù)；

2．有劑量反應(yīng)關(guān)系；

3．有動(dòng)物致癌試驗(yàn)陽性結(jié)果支持。