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特種醫(yī)學(xué)論文:苦參堿對肝癌細胞增殖及其細胞自噬的影響
[摘要] 目的 探索苦參堿對肝癌HepG2細胞增殖及其細胞自噬的影響，為臨床探索有效的肝癌綜合治療方案提供實驗依據(jù)。 方法 采用MTT法和流式細胞儀檢測肝癌HepG2細胞增殖抑制率及其細胞周期的變化；熒光顯微鏡定性觀察肝癌細胞自噬情況。 結(jié)果 苦參堿抑制肝癌HepG2細胞的增殖，且隨苦參堿濃度的增加和時間的延長，肝癌HepG2細胞的抑制率增加（P < 0.05)。流式細胞儀檢測示：苦參堿組細胞周期中G1期細胞增多，S期細胞減少（P < 0.05)。熒光顯微鏡檢測：肝癌HepG2細胞質(zhì)中有自噬體形成，且隨苦參堿濃度的增加，自噬體越來越多。 結(jié)論 苦參堿對肝癌HepG2細胞增殖有一定的抑制作用，苦參堿抑制肝癌細胞的同時誘導(dǎo)了自噬的產(chǎn)生�？鄥A誘導(dǎo)肝癌HepG2細胞自噬多發(fā)生在細胞周期的G1 期。
[關(guān)鍵詞] 苦參堿；肝癌細胞；自噬；細胞周期
[中圖分類號] R735.7 [文獻標(biāo)識碼] A [文章編號] 1674-4721（2013)03（a)-0011-03
在中國傳統(tǒng)醫(yī)藥中，苦參堿是一種從苦參、山豆根中提取的生物堿，其分子式為C15H24N2O。而苦參堿早被廣泛用于治療病毒性肝炎、肝纖維 化、心律失常等疾病[1]。國內(nèi)外研究表明[2]：無論是在體內(nèi)還是體外，苦參堿具有較高的抗腫瘤活性。它可以抑制腫瘤增殖、誘導(dǎo)分化、誘導(dǎo)凋亡、抗轉(zhuǎn)移 等作用，同時又具有免疫調(diào)節(jié)、升高白細胞、緩解癌痛等許多常規(guī)化療藥物所不具備的優(yōu)勢。此外，研究發(fā)現(xiàn)苦參堿誘導(dǎo)了大鼠C6膠質(zhì)瘤細胞的自噬[3]。而自 噬與腫瘤關(guān)系密切，同樣在抑制腫瘤中起著非常重要的作用[4-5]。細胞自噬在輔助化療藥物治療惡性腫瘤方面起著非常重要的作用。本實驗通過研究不同濃度 的苦參堿作用于肝癌HepG2細胞，探討苦參堿對肝癌HepG2細胞細胞周期以及細胞自噬的影響，為臨床化療藥物治療肝癌提供理論基礎(chǔ)。
1 資料與方法
1.1 一般資料
肝癌HepG2細胞由北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院提供�？鄥A（Matrine，廣州白云山明興制藥有限公司)、DMEM 4.5 g/L Glu（Gibco公司)、PBS液、胎牛血清（美國Sigma公司)、單丹磺酞戊二胺（MDC)（美國Sigma公司)、二甲基亞砜（DMSO)、熒光 顯微鏡（日本OlympuS公司)、CO2培養(yǎng)箱、離心機（北京醫(yī)用離心機廠)、流式細胞儀（美國BD公司，型號：FACSCalibur)、電熱恒溫培 養(yǎng)箱（河北省黃石市醫(yī)療器件廠)等。醫(yī).學(xué)全.在.線網(wǎng)站m.zxtf.net.cn
1.2 方法
1.2.1 細胞培養(yǎng)及處理 將肝癌HepG2細胞培養(yǎng)在含10%胎牛血清的DMEM 培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中，在37℃、5%CO2、飽和濕度下常規(guī)培養(yǎng)。顯微鏡下觀察細胞貼壁達80%時，用胰酶消化處理，取對數(shù)期細胞進行實驗。
