絲裂霉素原料藥－絲裂霉素－高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定絲裂霉素原料藥中絲裂霉素的含量。

供試品經(jīng)N，N-二甲基乙酰胺溶解并定量稀釋，進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長365nm處檢測絲裂霉素的峰面積，計算出其含量。

1.乙腈

2.醋酸銨緩沖液

3. 鹽酸溶液（0.01mol/L)

1.儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

苯基硅烷鍵合硅膠為填充劑

1.3 紫外吸收檢測器

2.色譜條件

2.1 流動相：醋酸銨緩沖液 甲醇=75 25

2.2 檢測波長：365nm

2.3 柱溫：室溫

1.酸銨緩沖液

取醋酸銨2.05g，加適量水使溶解，再加0.83mol/L醋酸溶液6.7mL，加水稀釋成1000mL。

2.鹽酸溶液（0.01mol/L)

取鹽酸0.9mL，加水適量使成1000mL，搖勻。

3.對照品溶液的制備

精密稱取絲裂霉素對照品適量，加N，N-二甲基乙酰胺溶解并定量稀釋成每1mL中約含絲裂霉素0.2mg的溶液，即為對照品溶液。

4.試品溶液的制備

精密稱取供試品適量，加N，N-二甲基乙酰胺溶解并定量稀釋成每1mL中約含絲裂霉素0.2mg的溶液，即為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各5mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器于波長365nm處測定絲裂霉素（C₁₅H₁₈N₄O₅)的峰面積，計算出其含量。