方法名稱(chēng)： |
醋酸甲羥孕酮—醋酸甲羥孕酮的測(cè)定—高效液相色譜法 |
應(yīng)用范圍： |
本方法采用高效液相色譜法測(cè)定醋酸甲羥孕酮的含量。 本方法適用于醋酸甲羥孕酮。 |
方法原理： |
供試品用甲醇溶解并稀釋成一定濃度的溶液，進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)254nm處檢測(cè)醋酸甲羥孕酮的吸收值，計(jì)算出其含量。 |
試劑： |
1. 甲醇（色譜純) 2. 水（色譜純) 3. 炔諾酮 |
儀器設(shè)備： |
1. 儀器 1.1 高效液相色譜儀 1.2 色譜柱 十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論板數(shù)按醋酸甲羥孕酮峰計(jì)算應(yīng)不低于2000，醋酸甲羥孕酮與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)峰分離度不低于3.0，主成分前一雜質(zhì)峰與主成分的分離度應(yīng)符合要求。 1.3 紫外吸收檢測(cè)器 2. 色譜條件 2.1 流動(dòng)相：甲醇-水= 70 30 2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm 2.3 柱溫：室溫 |
試樣制備： |
1. 對(duì)照品溶液的制備 取醋酸加羥孕酮對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加甲醇溶解并定量稀釋成每1mL中含0.8mg的溶液，精密量取該溶液與內(nèi)標(biāo)溶液各2mL，置10mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。 2. 供試品溶液的制備 取本品適量，精密稱(chēng)定，加甲醇溶解并定量稀釋成每1mL中約含0.8mg的溶液，精密量取該溶液與內(nèi)標(biāo)溶液各2mL，置10mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。 3. 內(nèi)標(biāo)溶液的配制 取炔諾酮適量，加甲醇制成每1mL中約含0.8mg的溶液，即得。 注：“精密稱(chēng)取”系指稱(chēng)取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一�！熬芰咳 毕抵噶咳◇w積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。 |
操作步驟： |
分別精密吸取上述對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μL 注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)254nm處測(cè)定，記錄色譜圖，按內(nèi)標(biāo)法以峰面積計(jì)算其含量。 |
參考文獻(xiàn)： |
中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，一部，p841。 |
