三黃片—鹽酸小檗堿的測定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定三黃片中鹽酸小檗堿的含量。

本方法適用于由大黃、鹽酸小檗堿和黃芩浸膏等組成的片劑。

三黃片由大黃、黃芩浸膏和鹽酸小檗堿組成,是一種具有清熱瀉火、消炎利便功效的常用中成藥。收載于《中國藥典》2000年版一部。其中鹽酸小檗堿的含量測定標(biāo)準(zhǔn)未作規(guī)定。目前文獻(xiàn)報道的測定方法有薄層掃描法、脈沖極譜法、分光光度法、示波極譜法和離子選擇電極法等。

本方法為高效液相色譜法，紫外吸收檢測器于波長347nm處檢測鹽酸小檗堿的吸收值，外標(biāo)法計算含量。本法操作簡便、精密度高、分離效果良好。

鹽酸小檗堿對照品(中國藥品生物制品檢定所,713 9204);乙腈為色譜純,水為高純水,甲醇、三乙胺、磷酸為分析純;三黃片為市售品。

1 儀器

1.1儀高效液相色譜儀，紫外檢測器，色譜工作站

1.2 色譜柱

色譜柱:ＫＦ Ｃ18(250ｍｍ×4.6ｍｍ,10μｍ,中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所) ,柱溫:室溫

1.3 紫外吸收檢測器

2 色譜條件

2.1 流動相：乙腈 0.05ｍｏｌ·Ｌ^-1三乙胺溶液(用磷酸調(diào)節(jié)ｐＨ至3.0)=35 65;流速:1.0ｍＬ·ｍｉｎ^-1

2.2 檢測波長：347nm，進(jìn)樣量:20μＬ。

1. 對照品溶液的制備

精密稱取鹽酸小檗堿對照品適量,加流動相制成36μｇ·ml^-1的對照品溶液。

2.供試品溶液的制備

取本品20片,除去包衣,精密稱定,研細(xì),精密稱取適量(約相當(dāng)于鹽酸小檗堿1.8ｍｇ),置50ml量瓶中,加流動相適量,超聲處理5min,加流動相稀釋至刻度,搖勻,濾過,取續(xù)濾液,再經(jīng)0.45μｍ的微孔濾膜濾過后,即得。取大黃粉、黃芩浸膏和其它輔料,按處方比例同法制得三黃片陰性空白溶液。

1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

分別吸取上述對照品溶液1，2，3，4，5，6ml，分別置10ml容量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,進(jìn)樣10μl測定,以鹽酸小檗堿的進(jìn)樣量(μg) 為橫坐標(biāo),峰面積為縱坐標(biāo),得回歸方程

2. 供試品的測定

精密吸取供試品溶液10μL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長347nm處測定吸收值，計算出其含量。

周文梟,曾立威,劉偉林. HPLC 測定三黃片中鹽酸小檗堿的含量.華西藥學(xué)雜志，2004，19（3)：220-221

李小燕.ＨＰＬＣ法測定三黃片中鹽酸小檗堿的含量. 中成藥，2002， 24（9)：679-680