三黃片—大黃素的測定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定三黃片中大黃素的含量。

本方法適用于由由大黃、鹽酸小檗堿和黃芩浸膏等組成的片劑。

供試品除去包衣，精密稱定，加無水乙醇加熱回流1h，濾過，取部分續(xù)濾液蒸干，加30%乙醇-鹽酸（10:1)加熱溶解，立即冷卻，用氯仿振搖提取4次，合并氯仿液，置水浴上蒸干，殘?jiān)�用無水乙醇-醋酸乙酯（2:1)溶解，搖勻，用濾膜濾過，取續(xù)濾液進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長254nm處檢測大黃素的吸收值，計(jì)算出其含量。

1. 甲醇（色譜純)

2. 乙醇 （分析純)

3. 磷酸（分析純)

1. 稱取供試品

取樣品20片，除去糖衣，精密稱定。研細(xì)，混勻，取約0.1g，精密稱定。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取大黃素適量，加無水乙醇-醋酸乙酯（2:1)制成每1ml含大黃素0.03mg的溶液。

3.供試品溶液的制備

取供試品錐形瓶中，精密加乙醇30ml，密塞，稱定重量，置水浴上加熱回流1h，放冷，用乙醇補(bǔ)足減失的重量，濾過，精密量取續(xù)濾液15ml，置燒瓶中，水浴蒸干，加30%乙醇-鹽酸（10:1)溶液15ml,置水浴上加熱溶解1h，立即冷卻，用氯仿振搖提取4次，合并氯仿液，置水浴上蒸干，殘?jiān)�用無水乙醇-醋酸乙酯（2:1)溶解，移置25ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，用0.45um濾膜濾過，取續(xù)濾液為供試品溶液

1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

精密量取上述對照品溶液1，2，3，4，5，6ml，分別置25ml容量瓶中,加無水乙醇-醋酸乙酯（2:1)釋釋至刻度,分別精密吸取10μl注入高效液相色譜儀,測定峰面積,以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo),峰面積為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

按供試品測定方法進(jìn)行測定，進(jìn)行線性回歸得標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2. 供試品的測定

精密吸取供試品溶液10μL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長254nm處測定大黃素的吸收值，計(jì)算出其含量。

苗明三，李振國.現(xiàn)代實(shí)用中藥質(zhì)量控制技術(shù).北京：人民衛(wèi)生出版社，2000,81