風(fēng)濕馬錢片－示的寧的測定－薄層掃描法

本方法采用薄層掃描法測定風(fēng)濕馬錢片中示的寧的含量。

本方法適用于中成藥風(fēng)濕馬錢片。

供試品加入濃氨試液、三氯甲烷搖勻，靜置，補(bǔ)重，濾過，制成供試液，點(diǎn)樣、展開，用薄層掃描儀進(jìn)行掃描，于波長λs=254nm，λ_R=300nm測量示的寧（C₂₁H₂₂N₂0₂)吸收度積分值，計(jì)算其含量。

1. 甲苯

2 .丙酮

3 .乙醇

4.三氯甲烷

5.濃氨試液

1 儀器

1.1薄層掃描儀

1.3涂布器

應(yīng)能使吸附劑在玻璃板上手工或自動涂成一層符合厚度要求的均勻薄層。

1.4點(diǎn)樣器

一般采用微升毛細(xì)管或與之相應(yīng)的點(diǎn)樣器材。

1.5展開室

可用適合薄層板大小的專用玻璃缸，底部平底或雙槽，蓋子須密閉。

2 材料

2.1玻板

用10cm×10cm、10cm×15cm、20cm×10cm或20cm×20cm的規(guī)格，要求光滑、平整，洗凈后不附水珠，晾干。

2.2吸附劑

硅膠GF₂₅₄，其顆粒大小一般要求直徑為10～40μm。

1. 對照品溶液的制備

精密稱取示的寧對照品適量，加三氯甲烷制成每1mL含0.15mg的溶液，作為對照品溶液。

2. 供試品溶液的制備

取本品20片，除去糖衣，精密稱定，研細(xì)，取適量（約相當(dāng)于3片的重量)，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入濃氨試液1 mL、三氯甲烷25 mL，密塞，輕輕搖勻，稱定重量，靜置24小時(shí)，再稱定重量，用三氯甲烷補(bǔ)足減失的重量，充分振搖，濾過，棄去初濾液，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

注：“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

1.薄層板制備

將吸附劑1份和水3份在研缽中向一方向研磨混合，去除表面的氣泡后，倒入涂布器中，在玻板上平穩(wěn)地移動涂布器進(jìn)行涂布（厚度為0.25～0.5mm)取下涂好薄層的玻板，于室溫下，置水平臺上晾干，在反射光及透射光下檢視，表面應(yīng)均勻，平整，無麻點(diǎn)、無氣泡、無破損及污染，于110℃烘30分鐘，冷卻后立即使用或置干燥箱中備用，或用商品預(yù)制板。

2.點(diǎn)樣

精密吸取供試品溶液 10μL、對照品溶液 5μL與10μL，分別交叉點(diǎn)于同一硅膠G F₂₅₄薄層板上，使成條狀。如用點(diǎn)樣器點(diǎn)樣到薄層板上，點(diǎn)成條狀，點(diǎn)樣基線距底邊1.0～1.5cm，條間距離可視擴(kuò)散情況以不影響檢出為宜。點(diǎn)樣時(shí)必須注意勿損傷薄層表面。

3.展開

將點(diǎn)好樣品的薄層板放入展開缸的展開劑中，以甲苯－丙酮－乙醇－濃氨試液（4：5：0.6：0.4)為展開劑，展開，取出，晾干。

4.含量測定

示的寧（C₂₁H₂₂N₂0₂)

在105加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，取出，在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定，選擇反射方式，采用吸收法，進(jìn)行掃描，波長：λs=254nm，λ_R=300nm，測量供試品吸收度積分值與對照品吸收度積分值，計(jì)算。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編、化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，一部p.394。