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紅芪-毛蕊異黃酮和芒柄花素的含量測定方法-HPLC

  
方法名稱:
  紅芪-毛蕊異黃酮和柄花素的含量測定-HPLC
應用范圍:
  紅芪的質(zhì)量控制提供了依據(jù)
方法原理:
 本品細粉加甲醇等超聲提取,經(jīng)液相色譜分離,在254nm處測定峰面積,外標法計算含量
儀器設備及實驗條件:
 

儀器設備 2695 型高效液相色譜儀(美國Waters公司)2996 二極管陣列檢測器;M32色譜管理站;

色譜條件  勝大連依利特C18柱(4.6mm×250mm,5μm,i.d.).水-乙腈為梯度流動相;溫度25 ℃;色譜圖光譜采集范圍:190~400nm;以黃酮為參照物檢測波長254nm。
試樣制備:
 

對照品溶液的制備  分別精密稱取毛蕊異黃酮、芒柄花素對照品,用甲醇溶解定容,制成濃度為毛蕊異黃酮2.350g/L,芒柄花素2.325g/L的對照品溶液

供試品溶液的制備  (正丁醇法) 用四分法稱取藥材2.500 g ,用甲醇超聲提取3(30、30、30mL) ,每次30 min蒸干甲醇。殘渣用40 mL 水溶解,再用正丁醇萃取4(40、402020mL),分取正丁醇層,減壓回收正丁醇至干,殘渣用甲醇超聲溶解,定容于5 mL 容量瓶中。0. 45μm膜過濾,進樣量10μ l,測定波長254 nm

(甲醇法) 用四分法稱取藥材2.500g ,用甲醇超聲提取3次,過濾提取液,濾液定容于25mL容量瓶中,用0.45μm膜過濾,進樣量30μl,測定波長254nm
操作步驟:
  在選定的色譜條件下,分別吸取對照品和供試品溶液進樣,測定峰面積值,按外標法計算含量
附件:
  點擊下載 (解壓密碼:m.zxtf.net.cn)
備注:
 
參考文獻:
  封士蘭,胡芳弟,趙健雄,徐靜汶,陳立仁. 高效液相色譜法研究紅芪指紋圖譜. 分析化學. 2004,32(6): 710~714
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