方法名稱： |
何首烏—蒽醌類成分的測定—HPLC-UV |
應(yīng)用范圍： |
用于何首烏中蒽醌類成分含量的測定 |
方法原理： |
本品用甲醇加熱回流，經(jīng)液相色譜儀分離，在254nm處測定峰面積，以外標(biāo)法計(jì)算含量。 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件： |
儀器設(shè)備 LC-10ATvp 高效液相色譜儀；SPD-10ATvp 紫外-可見檢測器， HW-2000色譜工作站。 色譜條件 色譜柱：DiamonsilC18 (250mm ×4.6mm，5μm)；流動(dòng)相：甲醇-0.1%磷酸(85∶15)；流速：1.0 mL/mim，檢測波長：254nm；柱溫：室溫。 |
試樣制備： |
對(duì)照品溶液制備 精密稱取大黃酸對(duì)照品、大黃素對(duì)照品、大黃酚對(duì)照品、大黃素甲醚對(duì)照品適量，加甲醇分別制成每1mL含大黃酸1. 600mg、大黃素1.680mg、大黃酚1.720 mg、大黃素甲醚1.600mg的溶液，作為對(duì)照品儲(chǔ)備液；分別精密量取上述對(duì)照品儲(chǔ)備液各1 mL，置10mL 量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，作為對(duì)照品溶液Ⅰ；再分別精密量取上述對(duì)照品儲(chǔ)備液各1mL，置20mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，作為對(duì)照品溶液Ⅱ(每1mL中含大黃酸0.0800mg、大黃素0.0840mg、大黃酚0.0860mg、大黃素甲醚0.0800mg) 。 供試品溶液的制備 取本品粉末(過四號(hào)篩)10g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加甲醇50mL，稱定重量，水浴回流1h，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為測定游離蒽醌的供試品溶液； 再精密量取續(xù)濾液10mL，置錐形瓶中，水浴揮干，加2.5mol/L 硫酸20mL，超聲處理5min，加三氯甲烷20 mL，水浴回流1h，放冷，移至分液漏斗中，分取三氯甲烷液，酸水液用三氯甲烷提取3次，每次15mL，合并三氯甲烷液，水浴揮干，殘?jiān)眠m量甲醇溶解，移置10 mL量瓶，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，作為測定總蒽醌的供試品溶液。 |
操作步驟： |
精密吸取對(duì)照品溶液Ⅱ以及供試品溶液10μl，分別注入液相色譜儀，按上述色條件測定峰面積，計(jì)算含量。 |
附件： |
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備注： |
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參考文獻(xiàn)： |
嚴(yán)寒，靜傅軍，梁從慶等不同采集地何首烏中蒽醌類成分的含量測定.中成藥.2007， 29（7)：1023～1026 |
