公開(kāi)(公告)號(hào)
|
CN1952179A
|
公開(kāi)(公告)日
|
2007.04.25
|
申請(qǐng)(專利)號(hào)
|
CN200610140463.3
|
申請(qǐng)日期
|
2006.10.09
|
專利名稱
|
一種檢測(cè)白介素-6基因啟動(dòng)子區(qū)多態(tài)性位點(diǎn)的方法
|
主分類號(hào)
|
C12Q1/68(2006.01)I
|
分類號(hào)
|
C12Q1/68(2006.01)I
|
分案原申請(qǐng)?zhí)? |
|
優(yōu)先權(quán)
|
|
申請(qǐng)(專利權(quán))人
|
中國(guó)人民解放軍總醫(yī)院
|
發(fā)明(設(shè)計(jì))人
|
田亞平;賈興旺;鄧心新;汪德清;董振南
|
地址
|
100853北京市復(fù)興路28號(hào)
|
頒證日
|
|
國(guó)際申請(qǐng)
|
|
進(jìn)入國(guó)家日期
|
|
專利代理機(jī)構(gòu)
|
北京君智知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所
|
代理人
|
向 華
|
國(guó)省代碼
|
北京;11
|
主權(quán)項(xiàng)
|
一種檢測(cè)白介素-6基因啟動(dòng)子區(qū)多態(tài)性位點(diǎn)的方法,它包括下述步驟: (1)設(shè)計(jì)用于擴(kuò)增含白介素-6基因-597G/A,-572G/C兩位點(diǎn)的DNA片段的引物: 正向引物:5’-AAAGGAGTCACACACTCC-3’; 反向引物:5’-GCGTTCCAGTTAATTTGTATTTG-3’; (2)設(shè)計(jì)分別用于檢測(cè)白介素-6基因啟動(dòng)子區(qū)-597G/A,-572G/C兩位點(diǎn)的探針,并用不同的熒光素分別標(biāo)記所述的兩對(duì)探針: 用于檢測(cè)白介素-6基因啟動(dòng)子區(qū)-597G/A位點(diǎn)的探針為: 檢測(cè)探針:5’-CTGCCTGGCCACCCTCA-3’; 錨定探針:5’-LC-Red 640-TTTCGTGCAGTTACTTCAAGGCGTCTCCAGG-3’; 用于檢測(cè)白介素-6基因啟動(dòng)子區(qū)-572G/C位點(diǎn)的探針為: 檢測(cè)探針:5’-ACAACAGCCCCTCACAGG-3’; 錨定探針:5’-LC-Red 705-GAGCCAGAACACAGAAGAACTCAGATGACTG-3’; (3)PCR擴(kuò)增,并進(jìn)行熒光檢測(cè); (4)描繪熔點(diǎn)曲線; (5)根據(jù)得到的特征性熔點(diǎn)曲線,判斷待測(cè)樣品的基因型; (6)對(duì)所述的待測(cè)樣品的基因型進(jìn)行測(cè)序驗(yàn)證。
|
摘要
|
本發(fā)明提供了一種檢測(cè)白介素-6基因啟動(dòng)子區(qū)多態(tài)性位點(diǎn)的方法,它運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光PCR儀結(jié)合熔點(diǎn)分析在同一反應(yīng)體系中實(shí)現(xiàn)了同時(shí)對(duì)白介素-6基因啟動(dòng)子區(qū)-572G/C,-597G/A兩位點(diǎn)多態(tài)性的檢測(cè)。本發(fā)明所述的方法與直接測(cè)序的檢測(cè)方法相比,操作簡(jiǎn)單,成本低廉,結(jié)果判斷直觀,反應(yīng)快速,并且每一反應(yīng)都是閉管進(jìn)行,有效減少了PCR污染的風(fēng)險(xiǎn)。
|
國(guó)際公布
|
|