| 公開(公告)號 | CN1896278A |
| 公開(公告)日 | 2007.01.17 |
| 申請(專利)號 | CN200610044681.7 |
| 申請日期 | 2006.06.12 |
| 專利名稱 | 乙型肝炎病毒耐藥基因突變的熒光定量PCR檢測方法 |
| 主分類號 | C12Q1/68(2006.01)I |
| 分類號 | C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/70(2006.01)I;G01N21/64(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權 | |
| 申請(專利權)人 | 山東省醫(yī)藥生物技術研究中心 |
| 發(fā)明(設計)人 | 魯艷芹;韓金祥;戚 鵬;闞洪晶 |
| 地址 | 250062山東省濟南市歷下區(qū)經(jīng)十路89號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構 | 濟南金迪知識產權代理有限公司 |
| 代理人 | 鮑光明 |
| 國省代碼 | 山東;37 |
| 主權項 | 一種乙型肝炎病毒拉米夫定耐藥基因突變的實時熒光定量PCR檢測方法，其特征在于，根據(jù)乙型肝炎病毒拉米夫定耐藥相關突變rtL180M、rtM204V/I，將突變位點分別設計在下游引物的3’端，上游引物為多聚酶區(qū)的一段保守的核苷酸序列，利用優(yōu)化的熒光定量PCR反應程序，通過熒光定量PCR反應，對從血清樣本提取的乙型肝炎病毒DNA進行PCR擴增，根據(jù)CT值和熔點曲線來檢測是否有突變發(fā)生。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種乙型肝炎病毒拉米夫定耐藥基因突變的實時熒光定量PCR檢測方法。乙型肝炎病毒拉米夫定耐藥相關突變位于DNA多聚酶基因的rtL180M、rtM204V/I突變。該方法利用PCR反應中引物在3’末端存在錯配時不能正確延伸的特點，將突變位點設計在熒光定量PCR引物的3’末端，采用合適的引物濃度，Touch-down PCR反應程序，同時結合嵌合有SyBrGreen I染料的PCR產物的熔點曲線。根據(jù)熒光定量PCR信號和熔點曲線，即可以判斷拉米夫定位點是否發(fā)生突變。該發(fā)明能準確快速地檢測乙肝病毒臨床標本中DNA突變，同時亦適用于其它基因的突變檢測。 |
| 國際公布 |
